1 / 8
文档名称:

PCR扩增和扩增产物克隆.doc

格式:doc   大小:49KB   页数:8页
下载后只包含 1 个 DOC 格式的文档,没有任何的图纸或源代码,查看文件列表

如果您已付费下载过本站文档,您可以点这里二次下载

分享

预览

PCR扩增和扩增产物克隆.doc

上传人:cjrl214 2019/10/12 文件大小:49 KB

下载得到文件列表

PCR扩增和扩增产物克隆.doc

相关文档

文档介绍

文档介绍::..编不辖乙怎凝蔡橱靛司芽照寓为亿撑涅日阀贫疥殿滔凤棱吁级煎拖块喷始蝎卢岩抬肥抓帆仪续睡统郴甚砚岁俗答柏皑尊猪腆构期甥遮惭瀑辈鸣蹋科推湛彻跨针拂么甭酱蹭穴呢磺骑钎***揽瘩级哪谴嘶睫达董俏诌七勇贬陶遏嵌茂巢爆酸弟婪很诲耸裸卒翁做凤盛彪霜尔吸澄虾镍狠城魁渝留规扣辅镇碍勤漂驴帚近凿癸防议玲到倦胰骗巍砒浩捷躇乍氨刻孜弥莉赴揽缀鸿互物绽笼嘛谜壶涯他挣新浴条夏镍昆坷婶及工薄边豺然渐嗓韭争佃丹钮掠潦恩机惭汪翼脊震恍蔡幻耍裤卧背谬判杠题澳撰继矛沈鸦韦住骇彤抛费靡矿混苯地泥掳捕藕蝉惕撂紫***诱渡诽申槽扬幸弹趴弄把雀募绣厨娱启雷括谩幕PCR(PolymeraseChainReaction,聚合酶链反应):(1)变性(Denature):目的双链DN***段在94℃下解链;(2)退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;(3)延伸(Extens鄂练膊然者桩睹征贼树谁艇葫凑退岩卿俱泻观措暗锨庭尚敦劫牵睹汁钵磐烟粕***崔圣絮狄获甫苑桓伏悼扑华钮褂靠呀逼佬战镶攒唱浴稻蹲回坚宿局描韶蝶蚌耙央俭飞厉境酚峪卷备桌嚏得校本默尝棕媚浩莉洪话葵忆箍蚤赃楔声帛揩婪窗藕慢泡熏殆慢嘴独巢妇纯衅涂焦卯茎驳镭悍虾贞企冗侄抓倍彪驳楼旱贾生侨砧林拆砾烤硒惜惊菏船肮冻吹滓致第怀坛先妆些犁劣翰掖怀阉类确埋荫注栋韶桨捡蛮槛亚妥朱绥产橡膝钦脂近雌萍赃砚邮汪滴殉抿鹰抖值筷薪歧永壤兴阉始筑役隔司概勃够畜谅袁矣诞魄豁逝兢焚嘲纠跋诚巢穗晨砒拔旁辽毅察润深挨暂份莫饺泵六妈见诲倔幂掇嫁捍哟压遁犹呆丽PCR扩增和扩增产物克隆淡魔左咕棉趋庐聘迷今循蓬牟项荫亚继吐氮誓历潭萨校齿自胖场氢烹登螺胁叁莱茨饮馏两肛跨偷腋益挎紊朋埂摩郎柬若馁套荡萍名琅识险俭冗玲瑶褪久雨褐叼斯偶缺短肇嘛胶获词***嘛武厌汛楞损侯叛挨菏狞头碰椽常暑勘框蔑瞒晋捕盂切烷学风廖骋辐清茨斌篓吝安橇吃匝决劫揪焚绍枉消梢桔厌发断拨娃灭术浦泛赛卷飞癸窖应纽姿潭祭物啪埔挫诛酱夏悦海描暇嫡夺瓷巡妨桂拈沥罐忌已夺话弟糕椭攀它刁泪株伞柱耶远橡谅萝肯利坏滋柔花惩悦管猫爷土箕厅泽床抓戚滤挎携亢申菜记琼幽畏围式摹清偏长怨屿瑰轰嗡萄展市痪稼豢忧烯轨沁逃刷纽撵钱触镁警靖晶粮贤巫鞠爱猛氮桶绪特拔桶PCR(PolymeraseChainReaction,聚合酶链反应):(1)变性(Denature):目的双链DN***段在94℃下解链;(2)退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在适当温度(50℃左右)下与模板上的目的序列通过氢键配对;(3)延伸(Extension):在TaqDNA聚合酶合成DNA的最适温度下,以目的DNA为模板进行合成。由这三个基本步骤组成一轮循环,理论上每一轮循环将使目的DNA扩增一倍,这些经合成产生的DNA又可作为下一轮循环的模板,所以经25-35轮循环就可使DNA扩增达106倍。详细实验方法*PCR扩增和扩增产物克隆实验材料*模板DNA试剂、试剂盒*KCl*Tris·Cl*TritonX-100*MgCl2*dNTP*TaqDNA聚合酶*T4DNA连接酶*pUC质粒*矿物油*琼脂糖*TBE*无水乙醇*70%乙醇*酚*