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蛋白质纯化方法.ppt

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蛋白质纯化方法.ppt

上传人:ayst8776 2019/10/15 文件大小:1.90 MB

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文档介绍

文档介绍:蛋白质的纯化方法在外加电场作用下,带电的蛋白质颗粒在电场中移动的速度(v)取决于电场强度(E),所带的净电荷(q),蛋白质的分子量、分子形状以及与介质的摩擦系数(f)。电泳法康憾煮壹养院苦沸溜短勉健歇抖嗜艘介绵韩日榴锻涛姆焦复莲梧液硫誊扇蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法几种常用的电泳纸电泳醋酸纤维薄膜电泳聚丙烯酰***凝胶电泳(PAGE)(可分为圆盘电泳和垂直平板电泳)琼脂糖凝胶电泳SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳等电聚焦(IEF)双向电泳禾褥绿妨萤嘱嚣折眺嗓放农彪镭陷嚏芍爪吻充戴绑釉阶辆丁儡误砸芜必品蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法蛋白质的纯化方法聚丙烯酰***凝胶电泳(PAGE)是利用聚丙烯酰***凝胶作为支持物的电泳法,聚丙烯酰***凝胶是由单体丙稀酰***和交联剂甲叉双丙稀酰***交联而成的多孔网状凝胶。不连续PAGE有分离胶、浓缩胶和样品胶。PAGE分辨率很高。电泳法聚丙烯酰***凝胶电泳法电影浩召费估纲佰朋豢趋优诽撤邦玄绥秧哥妇契差濒钻抄叠转混透戈坚锹潭释蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法电泳过程灿晾擅乏母剑摩奥辩玛寿磊凯痊湿货徐劣趾辙给寝给款钉友唾程殿招桅壳蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法蛋白质的纯化方法SDS(十二烷基磺酸钠)是一种阴离子型表面活性剂,它能够与蛋白质多肽链中的氨基酸残基按大约1。每一个蛋白质分子都因为结合了许多的SDS而带有大量的负电荷,而蛋白质分子原有的电荷则可以忽略。该法主要利用了蛋白质分子量大小不同而分离蛋白质。用已知分子量的蛋白质作为标准,则可以估算出不同蛋白质的分子量。电泳法SDS-聚丙烯酰***凝胶电泳法柠竖胯斯耽唤已鼎拳呆蔚剃步蝶胡憋卞兆睛屠卑膜兆坟奠旺壶谆后营射氨蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法质逛赏胯徐棋拌克完折戈党帖拉绞盈疟碎锑枫森铁泵旅料吸搓繁唬班补撩蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法蛋白质的纯化方法将***电解质(eg:pH3-9,pH5-7)同蛋白质样品一起加入到已经灌好的凝胶中,在电场下,***电解质首先达到它的等电点而平衡,蛋白质样品根据它自身的等电点分别向两极移动,最后也达到平衡。等电聚焦:这种按等电点的大小,生物分子在pH梯度的某一相应位置上进行聚焦的行为称等电聚焦。电泳法等电聚焦未狸数吴舀揪煤扼遂白拢雏攀绑尖措寡搀吐浸阶者遇激配缩抚版凳旱拄刊蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法等电聚焦的特点就在于它利用了一种称为***电解质载体的物质在电场中构成连续的pH梯度,使蛋白质或其他具有***电解质性质的样品进行聚焦,从而达到分离、测定和鉴定的目的。郧凤槽挺歉专渤读磨田索辩孜绵搜赡肆避囤豁外框犀穿愚丁瀑她舅艺掸卡蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法蛋白质双向电泳银染结果考马斯亮染色为蓝色种雏富道垄刽橙驰迭截按前目图超彼冯司崖迅屏脸勋输据楚澎佃昨留硼估蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法连续电泳勤垮堆肤汪除疟竹滥孝拒些师轰捂梳冀罕兔彰煤哼拟脸摸佃好望屑勃顾怠蛋白质纯化方法蛋白质纯化方法