文档介绍：广西大学
硕士学位论文
山羊痘病毒P32基因跨膜区缺失载体的构建与表达
姓名:朱伟
申请学位级别:硕士
专业:预防兽医学
指导教师:刘棋
20070606
论文作者签名:一,聚伟论文作者签名:一一粜庸词狈⒉如回年乡月/三广西大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明学位论文使用授权说明本人声明:所呈交的学位论文是在导师指导下完成的,研究工作所取得的成果和相关知识产权属广西大学所有,本人保证不以其它单位为第一署名单位发表或使用本论文的研究内容。除已注明部分外,论文中不包含其他人已经发表过的研究成果,也不包含体,均己在论文中明确说明并致谢。本人完全了解广西大学关于收集、保存、使用学位论文的规定,即:学校有权保存学位论文的印刷本和电子版,并提供目录检索与阅览服务;学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文:本人为获得其它学位而使用过的内容。对本文的研究工作提供过重要帮助的个人和集按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本:在不以赢利为目的的前提下,学校可以公布论文的部分或全部内容。请选择发布时间:口解密后发柿C苈畚男枳⒚鳎⒃诮饷芎笞袷卮斯娑导师签名,
山羊痘病毒蚩缒で笔г靥宓墓菇ㄓ氡泶摘要本课题首先建立了羊痘与羊口疮二重锒戏椒ǎ匝楸砻鞲梅椒ㄌ异性强、敏感性高,’可检测到腄模板,能很好区分症状相似的山羊痘和羊口疮,本试验检测了菀伤粕窖蚨徊×稀<斐錾窖蚨谎粜份,羊口疮阳性荨6怨阄魃窖蚨份阳性病料和国内现用的山羊痘疫苗株的白的全基因进行了┰觥⒖寺『筒庑颍⒔,..ィ窖蚨还阄鞣掷胫暧牍怂固笰以及印度的、和中国哈尔滨的分离株的核苷酸同源性为.%,推导的氨基酸同源性为.%;与国内使用的疫苗株的核苷酸同源性为..ィ频嫉陌被嵬葱晕..ィ还阄鞣掷胫辍⒐怂固沟腁《鹊、和中国哈尔滨的与现用的疫苗株相比,在位都缺失了霭被幔还阄鞣掷胫旰塑账位的碱基全部由湮狢,缓塑账峁钩捎蒚湟煳猅嗔个限制性内切酶坏悖呙缰旰凸诩肮獾腁、在缓塑账岫济挥懈孟拗菩阅谇忻该盖形坏悖因此用限制性内切酶梢郧忠呙缰暧牍阄鞣掷胫辏疚慕⒘列号分别是、、、、、一’朱伟
方法,疫苗株可以切成两个片段,广西分离株可以切成和銎巍NA私徊窖芯縋基因,本研究利用重组际跸齈基因跨膜区,用砑钥缒で笔昂蟮牡白图谱分析可知,跨膜区缺失前后的蛋白跨膜区位置的折叠构象、螺旋发生了一定变化,但抗原性在缺失前后未见变化,因此构建了一个缺失片段的重组质粒迅弥刈橹柿W;酱蟪Ω司鶥,用导进行原核表达,经检测表达产物,结果显示检测到虻谋达产物,用软件对表达产物分析,优化反应条件,最佳诱导时间为,最佳诱导浓度是/,分子量为分析结果显示,表达产物可被山羊痘标准阳性血清识别。关键词:山羊痘蚩寺〔庑蛑刈镻跨膜区表达猙广西大学硕士学位论文届
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前言身皮肤、黏膜广泛性的丘疹或结节、内脏器官痘斑为主要特征。由于本痞传播迅速,引起感染羊群大批死亡,尤其是新发病疫区,因此被世界动物卫生组织形狝类动山羊痘病毒只有一个血清型,具有嗜上皮性,大量存在于病羊皮肤及黏膜的丘疹、痂均匀的分布在整个基因组。鞍资巧窖蚨徊《灸夷け砻娴闹饕=峁沟鞍祝悄壳笆界各国分离、鉴定的所有羊痘病毒毒株所共有的且特异性很强的羊痘病毒结构蛋白,分位,具有跨膜结构,在病毒感染早期即可诱导动物机体产生中和抗体,强烈诱导细胞免疫,与细胞病变的产生有关,与宿主的交叉感染有关,对山羊痘虻难芯坑兄动物疫病,对其发病规律、流行病学特点、病毒的特性和防治技术等没有系统的认识。疫情,没有得到及时处理,造成柳州、来宾、河池、桂林、百色、南宁等主要养羊区爆疫苗株的免疫原性差异,为制定科学有效的山羊痘防控措施奠定了峰实的基础,为广西山羊痘是由山羊痘病毒引起的山羊的一种急性烈性传染病,该病以为体温升高,全物传染病,我国将其列为一类动物疫病。皮及眼、鼻分泌物内,在自然情况下,山羊痘病毒仅感染山羊,且具有高度的宿主特异性。山羊痘病毒基因组为线性、双股ǔぴ,暮拷系停嘉ィ珿/子量为,位于山羊痘病毒基因组处,由第号嗦耄锌乖建立特异快速的诊断方法和制定科学的山羊痘防控措施。⑸年仞广西部分县市的山羊群中发生了以皮肤和可视粘膜丘疹为主要特征的山羊痘发山羊痘,发病率为%、⒍陨窖蚨坏闹饕C庖咴曰騊基因进行克