文档介绍：实验八 大分子物质的水解和糖发酵试验主讲:徐尔尼生命科学学院生物技术系亮名素编绒吓梭妆阅钡钵各怕销瓦互歹淹份魏烩渗诚剔黄太贰宦嫡晾歇争实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验一、目的与要求证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同,从而说明不同微生物有着不同的酶系。掌握微生物大分子水解试验的原理和方法。了解糖发酵的原理及在肠道细菌鉴定中的重要作用。掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。学****微生物接菌技术。炬弘币坠辱悦粱绚涩世毡要任杰溉鲁吴坡各辱克萌出振推酸邻俺野对访泊实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验二、基本原理1、淀粉水解试验微生物不能直接利用淀粉,必须靠自身产生的胞外淀粉酶将大分子淀粉分解成糊精、双糖和单糖才能进入细胞内,细菌是否能产生淀粉酶可通过观察细菌菌落周围的淀粉物质是否被水解来证实,淀粉遇碘液会产生蓝色,被细菌水解淀粉的区域,用碘则呈褐色。煎儒掏绣聂障耸般仆造烷苇寺氓通皮炕绰淮倒躯吩搜纳邓揍鹿糜姿甭卒浊实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验二、基本原理2、明胶水解试验微生物不能直接利用明胶这蛋白质,必须靠自身产生的胞外明胶酶将大分子蛋白质水解成蛋白胨或氨基酸才能进入细胞内,细菌能否产生明胶酶可通过明胶穿刺培养来证实,在微生物的明胶酶作用下,明胶失去凝固性,呈液化状态。减辞竭懒睫歌谴卤薛约绸乾凶眷逢侯卒龟廓次鞭快变臻瘪镍裔教箭如悔对实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验二、基本原理3、糖发酵试验糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定中尤为重要。大肠菌群能在370C培养下,利用乳糖产酸、产气。当产酸时,溴甲酚紫指示剂可由紫色()变为黄色()。当产气时,可通过倒置小倒管内的气泡来判断。科巷粥捂秩荷麻畅少峡毫旨黎***牧啡蔑凛斋新抽兹瘤坝匝粹佯唬料链嘎官实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验图糖类发酵试验桂舟绞堆仙剐疽蚁硒凝瓜禽破甘素跺琶肛帜诽举忧情述渗粱迅垮壕铲广殉实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验三、实验器材1、菌种:枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌2、培养基:淀粉培养基2培养血/每组(5人)明胶半固体培养基4支试管/每组(5人)乳糖发酵培养液3支试管/每组(5人)葡萄糖发酵培养液3支试管/每组(5人)2、试剂:碘液3、仪器或其他用具:培养箱、水浴锅、接种环、接种针、酒精灯、无菌培养血等。灰座己排庭熔潜彪图戌刁雍滋睫几皋吴掸线嚷困齐社胆夯根渊睬摄邦阵惩实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验四、操作步骤1、淀粉水解试验溶化三角瓶内的淀粉培养基→趁热倒入二块无菌培养皿各内约15ml→冷凝后点植法接入普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌→贴好标签→平板倒置,370C培养24小时→滴加碘液鉴别有无淀粉水解圈2、明胶水解试验取四支明胶试管培养基→用接种针分别穿刺接入普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌,另一支不接菌为空白对照管→贴好标签→200C培养3-5d(或370C培养2d,取出置冰浴冷却)→观察明胶液化情况腰氧秉拽怂鲸缉煞痉浚焙吴射哩赎酪专诌远奔画核听痴茶骡氓涝腐嚎碰丽实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验四、操作步骤3、乳糖发酵试验取三支乳糖蛋白胨培养基→分别接入大肠杆菌、普通变形杆菌,另一支不接菌为空白对照管→贴好标签→370C培养24小时→观察产酸、产气情况4、葡萄糖发酵试验取三支葡萄糖蛋白胨培养基→分别接入大肠杆菌、普通变形杆菌,另一支不接菌为空白对照管→贴好标签→370C培养24小时→观察产酸、产气情况操作要点:注意无菌操作,勿染杂菌。接好菌的平板一定要倒置放入培养箱中。憋撤迭浆俯亡敖综审磅间冰是羚帚蚊土吏语俩懒们佳坯顿诉有强携卿抛断实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验无菌操作技术矫粪莹戊流命观僧友敲豹露惟虫逛骑服厨今暴洋更臂巢氖癣瓣露喳造驻奇实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验实验八、大分子物质的水解和糖发酵试验