文档介绍：方法名称:葛根素注射液—葛根素的测定—高效液相色谱法应用范围:本方法采用高效液相色谱法测定葛根素注射液中葛根素(C21H20O9)的含量。本方法适用于葛根素注射液。方法原理:供试品制成流动相溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长250nm处检测葛根素吸收值,计算出其含量。试剂:%:,理论塔板数按葛根素峰计算不低于2500,葛根素峰与相邻杂质峰间的分离度应符合要求。:%枸橼酸溶液甲醇=7525。::室温试样制备:。,加流动相溶液溶解并制成每1mL含50μg的溶液,摇匀,即得。,摇匀,即得。注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。操作步骤:分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长250nm处测定葛根素的吸收值,计算出其含量。参考文献:中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005年版,二部,。  山东省药品检验所 250012葛根素注射液为新型血管扩张药,用于冠心病、心肌梗塞、心绞痛的治疗,其主成分葛根素为豆科植物野葛Puerarialobata(Willd.)Ohwi的干燥根中提取、分离得到的以葛根素为主的异黄***苷类,其含量测定方法,卫生部药品标准(试行)[1]为紫外分光光度法。在生产和检验过程中发现,按100%投料,紫外法测定其含量可达标示量的103%左右,经薄层检查,其原料葛根素含杂质,易导致注射液测定含量偏高。本文采用高效液相色谱法,使葛根素与杂质得到良好分离后,测定葛根素的含量,其方法准确,结果可靠。1 仪器与试药TSP高效液相色谱仪(包括P2000泵,AS3000自动进样器,UV2000检测器,IBM350—450DX2数据站)。葛根素对照品(中国药品生物制品检定所提供);对-羟基苯甲醛内标物(山东省药物研究所精制,色谱纯)。乙醇(优级纯),重蒸馏水,丙二醇(分析纯),葛根素注射液(烟台中策药业有限公司提供)。2 色谱条件色谱柱:TurnerC18H37,×150mm;流动相:乙醇—水(43∶207);流速:1mL/min;柱温:30℃;检测波长:250nm;理论板数按葛根素计,不低于3000,与内标峰分离度大于5。3 线性关系试验取对-羟基苯甲醛适量,。取105℃干燥至恒重的葛根素对照品适量,精密称定,用流动相溶解,,精密取该溶液1、3、5、10、20mL,分别精密加入内标溶液10mL,摇匀,取各溶液10μL进样,记录色谱图(见图1)。以葛根素峰面积和内标峰面积之比Y与浓度X(mg/mL)做线性回归,得回归方程为:Y=+×10-3 r=~。 图1