文档介绍：DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。⑷DNA遇二苯***(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯***可以作为鉴定DNA的试剂。二、实验材料和用具鸡血细胞液(5~10ml);体积分数为95%的冷酒精溶液(实验前置于冰箱内冷却24h);蒸馏水;;质量的浓度分别为2mol/***化纳溶液(新教材不要求0、015的浓度了,都是用的2mol/L);二苯***试剂;铁架台;镊子;水浴锅;玻璃棒;滤纸;滴管;量筒(100ml,一个);烧杯;(1000ml,一个,50ml、100ml、500ml各二个);试管(20ml,二个);漏斗;试管夹;纱布。三、(抗凝剂)100ml,置于500ml烧杯中。注入新鲜的鸡血(约180ml),同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分混合,以免凝血。将烧杯中的血液置于冰箱内,精置一天,使血细胞自行沉淀。(也可以将血液倒入离心管内,1000r/min(转每分)的离心机离心2min,血细胞沉淀于离心管底部。实验时。用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液。四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液 5mL~10mL,注入到 50mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水 20mL,同时用玻璃棒充分搅拌 5min,使血细胞加速破裂。然后,用放有 1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至 1000mL。取其滤液。②溶解细胞核内的 DNA将***化钠的物质的量浓度为2mol/L的溶液40mL加入到滤液中,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈溶解状态。③析出含 DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现,注意观察丝状物呈什么颜色。继续加入蒸馏水,溶液中出现的粘稠物会越来越多。当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水(这时溶液中***化钠的物质的量浓度相当于 )经验值:需加约 570mL蒸馏水,且分多次加入。将溶液中的 DNA与其他杂质分离,这一步骤是实验成败的关键。实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于 DNA分子的附着和缠绕。④滤取含 DNA的粘稠物用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤 3中的溶液至 500mL的烧杯中,含 DNA的粘稠物被留在纱布上,滤液丢弃。⑤将DNA的粘稠物再溶解取1个50mL烧杯,向烧杯内注入***化钠的物质的量浓度为 2mol/L的溶液 20mL。用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至***化钠溶液中,用玻璃棒不停地搅拌,约 3分钟,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中。⑥过滤含有 DNA的***化钠溶液取1个100mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤 5中的溶液。取其滤液, DNA溶于滤液中。⑦提取含杂质较少的 DNA在上述滤过的溶液中,加入等体积的、冷却的、体积分数为 95%的酒精溶液 (使用冷却的酒精