文档介绍：:..XX大学毕业论文HIVTAT蛋白研究进展2014年6月25日HIVTAT蛋白研究进展【关键词】 人免疫缺陷病毒反式激活蛋白蛋白转导药物治疗人类免疫缺陷病毒1型(HIV1)基因能够编码一种被称为反式转录激活因子(transactivatoroftranscription,TAT)的蛋白。它通过与反式激活应答(transactivatingresponse,TAR)RNA序列结合以起始基因转录。TAT蛋口和REV蛋白一起作为HIV1的调控因子,在HIV的基因表达屮起着举足轻重的作用。研究发现,TAT蛋白能够穿过细胞膜[1,2],到达细胞外,具有细胞膜穿透肽(ratingpeptide,CPP)活性,其穿膜序列由11个氨基酸组成。这一特性具有非常重要的应用价值,因为它提供了一条转运其他蛋白或药物穿过细胞膜,进入细胞的途径。通过设计编码穿膜序列和其他蛋口的融合基因,表达后获得的融合蛋白,在TAT的引领下可以进入细胞。本文就TAT蛋白的生物学作用及其近年來的研究进展作一综述。1TAT蛋口结构TAT蛋口的基因包含2个外显了和一个含2334个核苜酸的内含了组成。在HIV1的各亚型中,TAT蛋白的氨基酸组成有所不同。在HIV1(HXB2)屮,TAT蛋白由86个氨基酸组成;而在HIV1(ConsensusB)1!1,TAT蛋白由101个氨基酸组成。按照结构和功能的不同可以将TAT蛋白划分为5个区:①酸性N末端区(1 21);②半胱氨酸(Cys)富积区(22-37),含有7个Cys,这在HIV各亚型中高度保守;③核心区(38-48),含有RKGLGI基序;④基本区(49・72),具冇RKKRRQRRR基序,并11具冇TARRNA结合活性;⑤细胞黏附的C■末端区(73・101),含有RGD基序,TAT通过RGD基序与细胞整合素结合。Vive等[3]发现,TAT蛋白屮具冇穿膜功能的序列是位于47〜57的11个氨基酸(YGRKKRRQRRR),富含碱性氨基酸(8个),被称为蛋白转导域(proteintransductiondomain,PTD)。为了更好地了解TAT蛋白的功能,加拿大Manitoba大学的Shojania等[4]采用15N和13C标记TAT(1・72)蛋白,并通过核磁共振(icresonance,NMR)对其结构进行了分析。,NMR化学位移和耦合常数表明它是以无规则卷曲的形式存在,半胱氨酸富含区和核心区的谱线增宽并出现多峰,捉示冇的结构域出现了II舜时折叠。通过NMR弛豫参量,光谱密度和LipariSzabo方法进行的分析都表明整个分子中没冇特定的结构,是一种天然未折叠蛋白(nativelyunfoldedprotein)。这与它能跟多种蛋白及核酸相互作用的功能相一致。2TAT蛋白在HIV引起的疾病屮的作用TAT蛋白作为一个反式激活作用因子,在HIV1基因复制过程中起重要作用,其基木区和核心区在反式激活作用屮起关键作用。TAT蛋白还可以在转录水平上调节宿主细胞的功能,它还能表现出许多生物学活性:诱导血管形成,单核细胞的趋化性及炎症细胞因子如IL1,IL6和TNFa等的分泌。TAT蛋口还可以促进来源于单核细胞的树突状细胞成熟