文档介绍：第二军医大学博士学位论文雌激素抗衰老的SIRT1蛋白机制研究姓名:杨瑞芳申请学位级别:博士专业:药理学指导教师:苏定冯20080501雌激素抗衰老的SIRTl蛋白机制研究oVXOVX+E2DMEMGAPDH17B-E2ROSCRERSODVSMCM噙PKJNK/SAPKSTSH202BSAEDl’o’—activatedproteinkinaseC-JunN·terminalkinases/stress-etraceticacidSprague-DawleyratsLactatedehydrogenase3·(4,5-dimenthylthiazol-2-y1)-2,5-diphenyltetrazoliumbromideTerminaldeoxynucleotidyitransferase(TdT)nicked-。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名:鹘《研日期:矽彦年易月匕日学位论文版权使用授权声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,第二军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:杨端最日期:油8年6月厂日导师签名::刎年6月r日雌激素抗衰老的SIRTl蛋白机制研究第一部分雌激素抗衰老的SIRTl蛋白机制研究摘要研究目的:衰老被认为是随时间而逐渐出现的机体器官功能和应激反应衰退并伴有发病率和死亡率增加的一个现象。衰老也被认为是心脑血管疾病等重要疾病的独立危险因素。目前认为衰老的病理机制主要是随年龄增长机体损伤的积累所致。如细胞内蛋白质、脂类和DNA等大分子不断受到外源性或内源性刺激而导致损伤。外源性的损伤包括紫外线的照射及环境中有毒物质的损害,而内源性的刺激主要是反应氧族(reactiveoxygenspecies,ROS)诱发的氧化应激的损伤作用。除了氧化应激在衰老机制中得到普遍共识外,还存在其他多种学说,如细胞凋亡率增加、染色体末端端粒逐渐变短、线粒体DNA突变率增加和累积、DNA***化水平的降低、免疫系统功能失调、体内干细胞数量的减少和功能的减退及女性更年期后雌激素分泌水平的降低等等。虽然目前存在多种学说解释衰老的发生,但是对于确切的机制及衰老是否受基因调控等问题,目前还不清楚。近年来,很多学者注意到当热量限制后,从真菌、线虫、果蝇甚至小鼠等动物的寿命均可明显延长,。Sir2是一种依赖NAD+的组蛋白去乙酰化酶。最先引发研究者兴趣的是,当过表达Sir2蛋白后,细胞组蛋白乙酰化的水平降低并且在酵母和多细胞生物还发现寿命延长的现象。另外,用Sir2的激动剂如白藜芦醇刺激酵母后,酵母的寿命也能明显延长,而且在线虫和果蝇甚至小鼠也能观察到这一现象。如果将Sir2基因突变或者用药物阻断Sir2后发现酵母的衰老过程是加速的。Sir2家族蛋白不仅调节组蛋白乙酰化的水平,还可调节多种转录调节蛋白、基因沉默、DNA修复以及细胞周期等因素以调控衰老的过程。Sir2在哺乳动物中被称为SIRTl。SIRTl能够将p53、Ku70及FOXO(forkheadboxclassO)去乙酰化从而抑制细胞凋亡;SIRTl还可通过增加hTERT的表达抑制端粒缩短;在白色脂肪细胞中SIRTl可阻断核受体PPAR吖第二军医大学博士学位论文达到抑制脂肪蓄积的作用。可见SIRTl能够通过多种途径发挥抗衰老的作用。哺乳动物中雌性的寿命长于雄性已达到共识。雌性Wistar大鼠平均寿命比雄性Wistar大鼠寿命长14%。在人类中,男性的平均寿命也比女性的平均寿命短。这个现象也告诉我们,性别之间寿命的差异不仅是社会背景的区别,更重要的是由性别之间生物学的差异造成的。进一步对Wistar大鼠的研究发现,雌性Wista