文档介绍：摘要:本实验利用平板涂布法,从土壤中分离并筛选产α-淀粉酶相对较高的菌株,通过碘-淀粉法对菌株进行鉴定,并对筛选的菌株进行紫外诱变,从土壤中分离得到了产淀粉酶相对较高的解淀粉菌株。关键词:α-淀粉酶;紫外线前言:淀粉酶广泛存在于动植物和微生物中,是最早用于工业生产并且迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一。淀粉酶种类繁多,特点各异,可应用于造纸、印染、酿造、果汁和食品加工、医药、洗涤剂、工业副产品及废料的处理、青贮饲料及微生态制剂等多种领域。在酿造发酵工业如酒精生产、啤酒制造、发酵原料液化及糖化工艺过程中均有重要价值,如添加a一高温淀粉酶可提高啤酒质量,中温蒸煮条件下添加适当耐高温α一淀粉酶可提高糖化率及酒精出酒率,降低甲醇含量,提高酒精质量,同时可提高设备利用率等。淀粉酶在面包焙烤过程中分解淀粉产生的可溶性糖被酵母转化成酒精和CO2气体,不仅能增加面包体积,同时还有改善面包表皮色泽、提高面包软度、延长保质期的作用,对面包冷却和冷冻也有重要作用。由于微生物数量多,繁殖快,工业生产主要采用微生物发酵法大量生产该制剂。本实验通过平板涂布法从土壤中分离并筛选产α-淀粉酶相对较高的菌株,通过利用碘-淀粉法对菌株进行鉴定,并对筛选的菌株进行紫外诱变。从土壤中分离得到了产淀粉酶相对较高的解淀粉菌株。。、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、电磁力搅拌器(含转子)、低速离心机、移液管、玻璃棒、试管等。)::牛肉膏3g、蛋白胨10g、***化钠5g,,121℃灭菌20min。分离培养基(g/1000mL):牛肉膏3g、蛋白胨10g、***化钠5g,琼脂粉20g,,121℃灭菌20min,待冷却到50℃时倒平板。—淀粉酶产生菌的筛选与鉴定取2g土样溶于18mL无菌水中,稀释至10-4,分别取10-2、10-3、10-,于37℃恒温箱中培养48小时。在平板上菌落周围滴加碘液,测量水解圈大小(H)和菌落大小(C),挑选H/C最大的菌,接种到液体培养基中,37℃恒温箱中培养24小时。,,倒置于37oC恒温箱中培养48小时。将培养至对数生长期的发酵液倾于无菌培养皿,置电磁力搅拌器上于超净工作台紫外灯下(距离30cm)分别照射5min、10min。将诱变菌株在红光下稀释100倍、1000倍,,倒置于37oC恒温箱中培养48小时。在长出菌落的周围滴加碘液,观察并测定水解圈大小(H)和菌落大小(C),并计算H/C比。二、,初筛出5株HC值较大的菌株(结果见表1),选出1株酶活性最强的菌株作为诱变出发菌株。表15株较优良出发菌株的HC值编号12345菌落(C)(H),菌株4的HC值最大,选出该菌株作为优良出发菌株。