文档介绍：实验一  多酚氧化酶(PPO)活性的测定 实验原理:多酚氧化酶是植物体内普遍存在的一种非线粒体内的末端氧化酶。他可以把酚类物质如单酚、邻苯二酚、邻***、对苯二酚等氧化为氧化为相应的醌类物质。醌类物质对病原微生物起抑制作用或杀伤作用,具有一定的抗病能力。因此,在感病的植物体中,PPO活性都具有不同程度的提高,以抵抗病原体进一步侵染健康的植物组织。此外,PPO对食品和饮料生产也会产生重大影响,它影响其品质,特别是在制作绿茶、红茶、烤烟和水果类饮料的过程中更为突出。所以,准确测定PPO活性,具有重要的生理和现实意义。多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下,能使酚氧化产生醌,PPO反应在3分钟内呈直线上升,其后反应速度变慢,因而在研究时,用分光光度在3分钟内于410纳米波长下测其吸光度,即可计算出PPO的活力和比活力。 思考题:1、粗酶液提取中***和磷酸缓冲液的作用,提取液为什么要预冷:***是有机溶剂,能提取PPO,磷酸缓冲液为了保持酶活性,预冷降低酶活。 2、为什么要先在37度下恒温,再加酶液:使酶和底物处于最适状态。  实验二    ***还原酶(NR)活性的测定 实验原理:***还原酶是植物氮代谢中的关键酶,植物吸收的***根,首先通过***还原酶的催化,还原成亚***根(NADPH+NO3-NR-NO2+NAD+H2O)。亚***根可用磺***显色法测定,即在酸性条件下,亚***根与对氨基苯磺酸发生重氮反应,生成的重氮化合物又与盐酸萘乙***生成红色偶氮化合物,可在520纳米下比色测定。 思考题1、为什么标准液与样品液的测定要在同一条件下:亚***的磺***比色法显色速度受温度和酸度等因素影响。 2、NR活性测定时取材为什么要进行一段时间的光和作用:进行光合作用积累一定糖类,否则酶活偏低。 3、测量酶活是为什么要在暗处:光下光反应会将形成的亚***根转变成铵根,影响结果。 4、如果实验材料酶活过低怎么办:可在取样的前几天,用50mmol/l***钾加在培养液中,以诱导***还原酶的生成。 5、为什么要严格控制时间:本实验要是酶在最适条件下测酶活,要严格控制时间。 磺***、盐酸萘乙二***和***钾的作用:在酸性条件下,亚***根与对氨基苯磺酸发生重氮反应,生成的重氮化合物又与盐酸萘乙***生成红色偶氮化合物,***钾作为酶促反应的底物,亚***钠用于制作标准曲线的梯度亚***浓度。 6、粗酶液提取中***和磷酸缓冲液的作用:磷酸缓冲液为了保持酶活性。  实验三   电导法测定植物细胞膜透性 实验原理:植物组织在受到各种不利环境条件危害时,细胞膜的结构和功能首先受到伤害,细胞膜透性增加,其外渗液中的电解质的含量比正常组织的外渗液含量增加,组织受伤害越严重,电解质的含量增加的越多。用电导仪测定外渗液电导值的变化,可反映出质膜受伤害的程度,也可反映植物的抗逆程度。 思考题:1、在处理材料时,为什么要用真空泵抽气:以抽出细胞间隙空气,缓慢放入空气中,水即渗入细胞间隙。 2、为什么要清洗电导电极和温度传感器以及其他玻璃器皿:由于电导值变化非常灵敏,稍有杂质就会产生很大误差,因此所用的玻璃器皿均需多次冲洗干净。 3、抗逆性强的植物材料外渗液中的电导率高还是低,为什么?电导值与抗性成反比。  实验四    植物光合与呼吸速率的测定 实验原理:由异原子组成的偶极距的气体分子,如CO2、CO、H2O、SO2、NO、