文档介绍：紫外分光光度法测定维生素C专业技能竞赛将标准贮备溶液和未知液配制成约为一定浓度的溶液。以蒸馏水为参比,于波长200~350nm范围内测定溶液吸光度,并作吸收曲线。根据吸收曲线的形状确定未知物,并从曲线上确定最大吸收波长作为定量测定时的测量波长。一、定性分析绘制苯甲酸吸收曲线的浓度约为10µg/mL。例如1mg/mL苯甲酸标准贮备溶液稀释100倍后浓度为10µg/mL。可以用吸量管吸取1mL标准贮备溶液于100mL容量瓶中,稀释至刻度,稀释100倍;也可以用胶头滴管吸取溶液,滴入大约25滴溶液于100mL烧杯中,大约稀释100倍。用配制好的溶液进行定性分析。一、定性分析从图可以看出维生素C有一个吸收峰,最大波长为267nm。由于仪器和溶液之间存在着误差,最大波长会在267nm附近上下波动1~2nm。维生素C标准使用溶液的浓度100µg/mL,维生素C标准使用溶液的配制,由1mg/mL维生素C标准贮备溶液到100µg/mL维生素C标准使用溶液,需要稀释10倍。可以用吸量管吸取10mL标准贮备溶液于100mL容量瓶中,稀释至刻度,稀释10倍,此时浓度为100µg/mL。二、、、、、、、(、、、、、、µg/mL),以蒸馏水稀释至刻线,摇匀。根据未知液吸收曲线上最大吸收波长,以蒸馏水为参比,测定吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制标准工作曲线。三、标准工作曲线的配制未知物维生素C的浓度为400~600µg/mL,试液的吸光度要处于工作曲线吸光度范围内(最好处于中间位置)。吸光度与浓度成正比,也就是浓度处于工作曲线浓度范围内(浓度为5µg/mL左右),所以未知液稀释100倍。准确移取未知液1mL分别于3个100mL的容量瓶中,以蒸馏水稀释至刻线,摇匀。根据未知液吸收曲线上最大吸收波长,以蒸馏水为参比,测定吸光度。根据待测溶液的吸光度,确定未知样品的浓度。测定如图2。根据测得的浓度和稀释倍数计算未知物的浓度。四、未知溶液的稀释