文档介绍：第37卷第2期湖南农业大学学报((:.,2,刘东波1,2,3*,夏志兰1,2,3,陈芳1,2(,湖南长沙410128;,湖南长沙410128;,湖南长沙410128摘要:运用CTAB法、CTAB改良法1、CTAB改良法2、***化苄法、裂解法、改良SDS法、改良尿素法等7种方法提取北冬虫夏草基因组DNA,发现CTAB改良法2(提纯时加入低浓度乙醇提取的DNA的OD260/,能获得清晰的PCR扩增图谱,能被HindⅢ酶切消化。关键词:北冬虫夏草;基因组DNA;提取中图分类号:Q503文献标志码:A文章编号:1007−1032(201102−0147−parisonofgenomicDNAextractionfromCordycepsmilitarisKANGXin-cong1,2,LIUDong-bo1,2,3*,XIAZhi-lan1,2,3,CHENFang1,2(,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China;-HealthInterventionTechnology,StateAdministrationofTraditionalChineseMedicine,Changsha410128,China;,Changsha410128,ChinaAbstract:paretheDNAextractionmethodsof7kindsofextraction:CTABmethod,improvedCTABmethod1,improvedCTABmethod2,benzylchloridemethod,lysismethod,improvedSDSmethod,(improvedCTABmethod2(,theDNAwasamplifiableinthepolymerasechainreaction(pletelydigestiblewithrestrictionendonucleasesHindⅢ.Keywords:Cordycepsmilitaris;genomicDNA;extract收稿日期:2010−11−16基金项目:国家科技支撑计划项目(2006BIA06A20作者简介:康信聪(1988—,女,江西吉安人,硕士研究生,主要从事功能食品开发与评价研究,kangxincong@;*通信作者,chinasaga@由于北冬虫夏草某些活性成分如虫草素含量高于冬虫夏草[1−4],常被作为冬虫夏草的替代品在临床上应用。北冬虫夏草的分子生物学研究需要能迅速分离出纯度高、相对分子质量大的基因组DNA[5]。笔者借鉴了大量食用菌基因组DNA的提取方法,对北冬虫夏草基因组DNA的提取方法进行比较研究。。,菌148湖南农业大学学报(。方法1:CTAB法,参照文献[6]。方法2:CTAB改良法1,参照文献[7−8],,并在加入CTAB提取缓冲液后再加入蛋白酶K进行裂解,沉淀后加入低浓度的NaCl对DNA进行溶解,再用***仿∶异戊醇(24∶1进行抽提。方法3:CTAB改良法2,参照文献[9],用苯酚∶***仿∶异戊醇(25∶24∶1进行提纯的同时,加入30%体积的无水乙醇对杂质多糖进行沉淀。方法4、5、6、7分别为***化苄法、裂解法、改良SDS法、改良尿素法,参照文献[10−13]。。将所得DNA提取液稀释后,ShimadzuUV1800紫外分光光度计测定260、280nm处的吸光度以及DNA质量浓度,并根