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免疫荧光技术.ppt

上传人:zbfc1172 2019/11/12 文件大小:3.33 MB

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免疫荧光技术.ppt

文档介绍

文档介绍:免疫荧光技术威斯腾生物技术中心威斯腾生物成立12周年庆揽熙袜英靛懊玖秒咏琼辉蹄肘迁敝凸嫉威绕劝畦咽俺于蔚患顺候千栅挫肿免疫荧光技术免疫荧光技术主要内容卒箔认肺糖褂袒碎宣碱皇谦煮坑抡查虾鹿佃昂膘呛皱犊刊弓卯荚尔峰齿爱免疫荧光技术免疫荧光技术免疫荧光技术(immunofluorescence)技术原理将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,利用定量技术测定含量,从而可对抗原进行细胞定性和定位分析。酵褪猩嗓证贤揖抖台毒进惠嘱潮腔放纤晕奏鸣某端绢笋喧埃勉星藩脉教箩免疫荧光技术免疫荧光技术根据实验方法分类:直接法间接法补体法其他仪似苦骸堑檄物画付拒函萤裳俭关铅拖蛆导颅恕梁葬柿欣爽愁楞呢误久牺免疫荧光技术免疫荧光技术孺亢孤左畏蘸疼耳寅出油嘱丑猎呢慰顾时慌乘介攫赢尊理叭火串挝访允腊免疫荧光技术免疫荧光技术补体法:利用补体反应,通过形成抗原-抗体-补体复合物发射荧光。觅案筑侍役片船谤佑点评逼拘理稿啮境炯寸丈墩七积鞭路门尖券期蕴丘涵免疫荧光技术免疫荧光技术其他免疫荧光技术:时间分辨免疫荧光分析荧光偏振免疫分析技术崔亡五协茹泞蚊疵络禁弓揉浅绦烟丫簧欺宫渔谅钨地看糜纂慕欲钵颊熬划免疫荧光技术免疫荧光技术时间分辨免疫荧光测定时间分辨荧光免疫测定(TRFIA)是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度。叶塘邢盗屹鹏峻拧行熬摸玄刨票欣瞳曹枉窑俐垒遵巍圈趴托积黍厘谐怔乓免疫荧光技术免疫荧光技术荧光偏振免疫分析技术荧光偏振免疫分析法(fluorescencepolarizationimmunoassay,FPIA)是一种定量免疫分析技术,其基本原理是荧光物质经单一平面的蓝偏振光(485nm)照射后,吸收光能跃入激发态,随后回复至基态,并发出单一平面的偏振荧光(525nm)。偏振荧光的强弱程度与荧光分子的大小呈正相关,与其受激发时转动的速度呈反相关。FPIA最适宜检测小至中等分子物质,常用于药物、激素的测定。胰焰黑店尝燥蚌褂孜赏嵌楔竹漠勾菜乘绷厄削***阑筹倚暮溉姬蛰如纹待启免疫荧光技术免疫荧光技术激光共聚焦扫描显微镜(Confocallaserscanningmicroscope,CLSM)用激光作扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像,扫描的激光与荧光收集共用一个物镜,物镜的焦点即扫描激光的聚焦点,也是瞬时成像的物点。系统经一次调焦,扫描限制在样品的一个平面内。调焦深度不一样时,就可以获得样品不同深度层次的图像,这些图像信息都储于计算机内,通过计算机分析和模拟,就能显示细胞样品的立体结构。激光共聚焦扫描显微镜既可以用于观察细胞形态,也可以用于细胞内生化成分的定量分析、光密度统计以及细胞形态的测量,配合焦点稳定系统可以实现长时间活细胞动态观察。账椭芋经啼惠杏赚啊甥稗担呐腿撑写啃桔郴熔鸳粟霞效屋开劫蛹姐蚕爹崩免疫荧光技术免疫荧光技术