Sf9细胞的培养及转染.ppt

文档介绍：Sf-9细胞的培养及转染Sf-9细胞Sf--SF21AE得来的一个克隆。IPLB-SF21AE是1977年由Vaughn等从草地夜蛾蛹的卵巢组织得到的。Sf-9是半贴壁的细胞,贴壁性不强,可贴壁培养也可悬浮培养。Sf-9细胞的形态培养细胞生长的条件1、细胞的营养需要2、细胞的生存环境 温度:28℃ 氧 pH:- 渗透压3、无污染4、无毒实验材料:实验用品:超净工作台,压力蒸汽消毒器,电热干燥箱,滤器,酸缸生化培养箱倒置显微镜酶标仪、微孔板震荡器液氮罐自动双重纯水蒸馏器,纯水仪耗材:培养瓶,吸管,电动吸引器,培养板,冻存管超净台超净工作台的工作原理是利用鼓风机驱动空气遁过高效滤器除去空气中的尘埃粒,使空气得到净化。净化空气徐徐通过工作台面,使工作台内构成无菌环境。生化培养箱生化培养箱设定的条件为28℃。使用生化培养箱培养细胞时应注意的问题:1)保持培养箱内空气干净。定期消毒(90℃,14h)。2)箱内灭菌蒸馏水3000ml蒸馏水槽中以保持箱内湿度,避免培养液蒸发。培养瓶拿培养瓶的正确姿势:拇指和食指夹住培养瓶,瓶口向外,中指托住瓶底。保持瓶子的水平,防止培养液倒向瓶口。血球计数板