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血小板标准操作(sop).doc

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血小板标准操作(sop).doc

上传人:iris028 2019/11/14 文件大小:107 KB

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血小板标准操作(sop).doc

文档介绍

文档介绍:AGGRAM血小板聚集分析仪标准操作程序仪器的检测原理AGGRAM系统的方块图见图2-1。其中所有内容都由计算机控制并监测。软件和存储器通过硬盘和CD驱动器提供。所有的用户输入都通过键盘和鼠标。输入的内容包括选择测试类型、开始或停止自动操作序列、输入病人数据、选择仪器参数、改变显示等等。打印机用于打印检测结果。RS232输出口可向外接计算机传输数据。计算机开机后运行自测程序检测错误条件或潜在问题。如果监测到错误,计算机将显示出错误信息。()图2-1血小板聚集检测原理血小板在血栓形成中起重要的作用。血凝的过程也依靠其它物质的存在,例如:凝血酶、促凝血酶、组织凝血活酶、钙离子和纤维蛋白原。因为随着血小板聚集使血浆的光密度减少,通过光学方法检测血小板的功能。血液中的化学变化或血液异常能够改变血小板的功能,所以血小板聚集检测具有诊断价值。许多物质(聚集剂)会诱发血小板聚集。这些物质包括ADP、胶原、肾上腺素、5-羟色***、花生四稀酸和瑞斯托霉素。临床医生可根据需要选择聚集剂以便获得更多的临床信息。按照试剂说明书提供的步骤准备富血小板血浆(PRP)并进行检测。初始吸光度是由溶液中漂浮的血小板引起光散射。吸光度与血小板数量几乎成正比。乏血小板血浆(PPP)源自同一份样品聚集率为100%。通过检测PPP的吸光度可测量除血小板外的其它因素产生的光散。当已知数量的诱导剂加入PRP中,血小板的聚集能力是由诱导剂的量决定的。未反应的PRP与诱导剂的混合物的吸光度代表聚集率为0%,而PPP质控的吸光度代表聚集率为100%(无漂浮的血小板)。随着血小板的聚集,漂浮血小板的数量减少,PRP的吸光度减低。与聚集曲线有关的各种参数,或最大聚集率被记录下来作为数据。标本的收集和处理标本:,脂血或黄胆的标本不建议使用。病人的准备:1)抽血时,病人节禁食至少8个小时以上。2)病人最好未服用任何药物。对于血小板功能的研究来说病人在检测前7-10天不应服用阿司匹林或含有阿司匹林的药物。标本的收集尽可能无损伤地抽取标本。将抽取的标本注入含有抗凝剂的塑料管内。血小板聚集功能试验的准确性依赖于全血与抗凝剂的正确比例。由于红细胞压积与血浆容积呈反比,全血与抗凝剂的比例必须进行相应的调整。如果不知道病人的红细胞压积,抽血前就按照病人准备部分的要求准备抗凝的全血。对于红细胞压积在40-50%(正常范围),9份新鲜全血加入1份抗凝剂。对于红细胞压积超过正常范围之外的标本,按照下面的公式调整抗凝剂的量:全血体积(ml)=      91ml抗凝剂    1-红细胞压积  特别注意使用真空采血管进行抽血时,其设定为9份血配1份抗凝剂。在整个标本收集和运送过程中,只能使用塑料或硅化的玻璃器皿。标本准备:1)准备富血小板血浆(PRP):室温下,离心力为100g,离心10-15分钟抗凝的标本。注意要不间断地离心。使用塑料吸头提起上面的PRP放于塑料管内,并标记为PRP。加盖并在室温下保存,稳定30分钟后可供检测使用。2)准备乏血小板血浆(PPP)  :室温下,继续离心提取PRP后的标本。离心力为1600-2000g,离心10-15分钟。注意要不间断地离心。使用塑料吸头提起上面的PPP放于塑料管内,并标记为PPP,加盖在室温下保存。3)对病人的PRP和正常质控PRP进行血小板计数。通过自体PPP的调整可将PRP的血小板数目标准化(25万/mm3)。质控血浆的血小板数目应与病人的相同。如果病人的血小板数目较低,则质控血浆血小板数目应与之一致。如血小板数目低于1万/mm3会得出不稳定的结果。4)储存和稳定性:血浆与全血相同要保存在室温下(15-30℃)。加盖保存可维持PH的稳定。检测应在标本采集后的3个小时内进行。.        ADP(腺苷二磷酸)试剂成分(复溶后)ADP            200uM注意:仅供体外诊断使用,不得吸入使用前准备:准备储存液用1ml蒸馏水复溶1瓶试剂,轻轻混合直到完全溶解。储存和稳定性干粉状ADP试剂保存在2~6℃可稳定至有效期。复溶后试剂保存在2~6℃可稳定一周或在-20℃下保存3个月。工作液应在制备后的3个小时内使用。试剂变质的标志:如果干粉状,未复溶的试剂出现不均匀一致白色外观,应弃去不宜使用。.        肾上腺素试剂成分(复溶后)肾上腺素酒石酸氢盐      1mg/ml(其中肾上腺素548ug/ml)注意:仅供体外诊断使用,不得吸入使用前准备:准备储存液用1ml蒸馏水复溶1瓶试剂,轻轻混合直到完全溶解。储存和稳定性干粉状肾上腺素试剂保存在2~6℃可稳定至有效期。复溶后试剂保存在2~6℃可稳定一周。试剂变质的标志:如果干粉状,未复溶的试剂出现不均匀一致白色外观,应