文档介绍：对象:全院职工医疗药事制度文件名称:ABO血型鉴定()编写日期::::①本文件仅供本院人员使用,未经同意,不得翻印②本文件最终解释权归输血科ABO血型鉴定【原理】人类ABO血型系统包括四种主要的表现型:A、B、O和AB。ABO血型由红细胞上A和B抗原的有或无决定,ABO系统还以血清中存在自然发生的规则抗体为特点,即血清中含有针对自身红细胞所缺的A或B抗原产生的同种凝集素(也称为“天然抗体”)。人类红细胞上A和B抗原的有或无与血浆中抗A和抗B抗体的产生存在着相反的互补关系。例如O型个体红细胞上缺少A和B抗原,其血清中含有抗A和抗B抗体。利用红细胞凝集试验,通过正反定型可以准确鉴定ABO血型。所谓正定型,也称红细胞定型试验,是指用标准抗A和抗B试剂来测定红细胞上的A抗原和B抗原;所谓反定型,也称血清定型试验,是指用标准A型和B型红细胞来测定血清中有无相应的抗A和抗B抗体。“天然抗体”的免疫原可能是肠道及环境中的细菌,例如在大肠埃希菌的脂多糖外壳中含有ABO类似结构。。【样本】抗凝或不抗凝的样本均可用于ABO鉴定试验。红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中,也可以洗涤后悬浮于盐水中。通常情况下,试管法正定型被检样本与反定型中试剂红细胞悬液浓度皆为2%~5%。【试剂】(1)抗A血清(2)抗B血清(3)2%~5%的A1型、B型红细胞盐水悬液(4)如果需要,可增加抗A,B试剂和A2血型红细胞.【操作】(1)正定型:检测红细胞上的A或B抗原。①加1滴抗A到一支洁净试管中并标记;②加1滴抗B到一支洁净试管中并标记;③如果需要,可选做加1滴抗A,B在第3支试管,并标记;④向每一支试管滴加1滴2%~5%的待检红细胞悬液;⑤轻轻混匀,按照校准速度和时间离心,通常(900~1000)×g离心15秒;⑥轻轻重悬细胞扣,检查凝集情况;⑦观察、解释、记录试验结果,并与血清(血浆)试验结果对照(2)反定型:检测血清或血浆中的抗体。①取2支洁净试管,分别标记A1和B,分别向其中滴加2~3滴血清或血浆;②加1滴A1试剂红细胞到标记A1的试管;③加1滴B型试剂红细胞到标记B的试管;④如果需要,加1滴A2试剂红细胞到一支已加入2~3滴血清或血浆的试管中,并做好标记;⑤轻轻混匀,按照校准速度和时间离心,通常(900~1000)×g离心15秒;⑥检测是否有溶血现象,然后轻轻重悬细胞扣,检查凝集情况;⑦观察、解释、记录试验结果,并与红细胞试验结果对照。【结果判定】(1)细胞试验中的凝集以及血清或血浆试验中的溶血或凝集均为阳性结果(2)细胞扣重悬后表现为均匀的细胞悬液是阴性结果(3)凝集强度判断标准参见表1-5-1(4)ABO定型的血清或血浆试验以及红细胞试验的解释见表1-5-2(5)如果红细胞定型试验与血清定型试验结果不一致,应通过进一步试验解决,然后才给出ABO血型结果(6)混合视野凝集的情况,应进一步找出原因:例如是否混合血样标本,近期有无输血史,是否白血病急性期或者ABO亚型等表1-5-1凝集强度判读4+=红细胞凝集成一大块,血清清晰透明。3+=红细胞凝集成数小块,血清尚清晰。2+=红细胞凝块分散成许多小块,见到游离红细胞。1+=肉眼可见大颗粒,周围有较多游离红细胞。+/—=镜下可