文档介绍：ABO血型鉴定操作规程
1 目的
指导工作人员进行ABO血型实验。
2 适用范围
血型检验岗位工作人员
3 职责
负责送检标本ABO血型的检测工作。
4 【原理】
ABO血型鉴定,是根据IgM类特异性血型抗体与红细胞膜上特异性抗原结合能出现凝集反应的原理,用已知IgM类特异性标准抗A和抗B血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B抗原。同时用已知标准A型红细胞和B型红细胞来测定血清中有无相应的天然IgM类抗A或/和抗B。
【标本】
1. ~。
【器材】
载玻片、滴管、小试管、台式离心机或微柱凝胶离心机、玻璃棒、蜡笔或记号笔、显微镜等。
【试剂】
抗-A、抗-B试剂
5%和10%A、B及O型试剂红细胞盐水悬液
受检者血清
受检者5%和10%红细胞盐水悬液
10mm×60mm透明的玻璃试管或塑料试管
【操作步骤】
试管法
:取洁净小试管2支,分别标明抗-A、抗-B,用滴管加入抗-A和抗-B分型血清各 2滴于试管底部,再以滴管分别加入受检者5%红细胞盐水悬液1滴,混匀。
:取洁净小试管3支,分别标明A型、B型和O型细胞。用滴管分别加入受检者血清2滴于试管底部,再分别以滴管加入A、B、O型5%试剂红细胞悬液1滴,混匀。
(离心时间为离心机校准时间)。
,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象,如肉眼观察不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜下观察有无凝集。
编写者:梁冀文校检者:崔玲珍审核者:朱永和
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凝集强度判断标准
4+=红细胞凝集成一大块,血清清晰透明;
3+=红细胞凝集成几大块,血清尚清晰;
2+=红细胞成中等大凝块,游离红细胞<1/2;
1+=红细胞成小凝集块,游离红细胞>1/2;
±=红细胞成微小凝集块,周围有很多游离红细胞。
MF=混合凝集外观(mixed fieLd)是指镜下可见少数红细胞凝集,而极大多
数红细胞仍呈分散分布。- 表示阴性,镜下未见凝集,红细胞均匀分布。
报告受检者红细胞ABO血型如下表所示:
ABO血型鉴定结果判断
分型血清+受检者红细胞受检者血清+试剂红细胞
抗-A 抗-B 受检者血型 A细胞 B细胞 O细胞
+ - A - + -
- + B + - -
- - O + + -
+ + AB - - -
注+为凝集;-为不凝集
玻片法
:取清洁玻片1张,用记号笔分别标明抗-A、抗-B,用滴管加入抗
-A和抗-B分型血清各 1滴于玻片标记相对应处,再以滴管分别加入受检者10%红细胞盐水悬液1滴,混匀。
:取清洁玻片1张,用记号笔分别标明A型、B型和O型细胞。用滴管分别加入受检者血清1滴于玻片标记相对应处,再分别以滴管加入A、B、O型10%试剂红细胞悬液1滴,混匀。
,使血清与细胞充分混匀,连续约15min,以肉眼观察有无凝集反应。如肉眼观察不