文档介绍：杆状病毒多基因表达系统介导的轮状病毒样颗粒表达与组装龙虎%: $!姚伦广$!王姗姗%!陈士新!!谭佩婵%!孙京臣%"%华南农业大学动物科学学院!广东广州!0%")&$#$南阳师范学院伏牛山昆虫生物学重点实验室!河南南阳!&#!")%#!海军广州基地赤沙干休所!广东广州0%"$!"$摘要!目的构建能同时表达轮状病毒BH$!BH)!BH#基因的重组家蚕杆状病毒"并在+N4细胞中进行初步表达#方法利用E/%"&细胞繁殖人/组轮状病毒"2?7*F2扩增病毒结构蛋白BH$!BH)!BH#基因"连接至转移载体HG+>E和HaF>E中"同时引入含X(%启动子的绿色荧光蛋白基因利于检测感染和表达量"再分别通过?D#*重组构建重组病毒$为方便检测基因的表达"在I*#的F7末端添加)7组氨酸;)7<CR=标签"可通过(.X,/等方法快速检测目的基因表达$结果扩增获得了轮状病毒三个结构蛋白基因"构建了能高效组装轮状病毒样颗粒的重组表达载体"(.X,/检测I*#得到了表达"在+N4细胞中观察到病毒样颗粒$结论成功构建杆状病毒多基因的表达系统"为生产多亚基蛋白复合物"研究大分子结构提供借鉴$关键词!轮状病毒样颗粒%家蚕杆状病毒%多基因表达系统%+N4细胞%疫苗中图分类号!e’!’i&#j 20%$i0j ,10$i )0文献标识码!/文章编号!%)#!7&$0&&$"%"’"#7%&’%7"0!"#$%&&’() *+, -&&./012 (3 $(4-56$7&71689 :;$46<1%& 6+ 6+&%<4 <%11& /%=6-49= >2 $9<(/>6+;+4!"#$%& ’"()?7146@;<.54J <@%:$: T/5 .***@******@8D3$: 6/4J ,P8D7RP8D%:F<(4 ,PCD7VCD!: ?/4 *QC7KP8D%: ,a4 dCD37KPQD%%FSLLQ3Q SM /DCN8L ,KCQDKQ: ,******@OP FPCD8 /******@******@A8L aDCBQARCO]: ******@8D39PS@ 0%")&$: FPCD8j$<QD8D *ASBCDKC8L WQ] .8\SA8OSA] SM ******@******@******@DO8CD XDRQKO +CSLS3]: 48D]8D3 4SAN8L aDCBQARCO]: 48D]8D3 &#!")%: FPCD8j!48B8L +8RQ CD ******@8D39PS@: FPCRP8 ,******@N MSA2QOCAQZ F8ZAQR: ******@8D39PS@ 0%"$!": FPCD8A>&4$;<4B .&?S ******@KO AQKSN\CD8DO \******@******@RQR KS7QVHAQRRCD3 OPAQQ ******@******@A8L 3QDQR BH$: BH) 8DZ BH# ******@R: 8DZ 8RRQN\LQ ******@R7LC^Q H8AOCKLQR ;I.*R= CD +N4 KQLLRi?.4G(,&<***@N8D ******@H / ******@R c8R ******@LOCB8OQZ CDE/%"& KQLLR: 8DZ OPQ 24/ c8R QVOA8KOQZ 8DZ OPQ OPAQQ 3QDQR cQAQ S\O8CDQZ \