文档介绍：万方数据
基因修饰的对人9苣谄は赴蛲龅挠跋周俊平蠲粲,楼国良锩受体/神经生长因子受体疦、肿瘤坏死与涣#5嫉蛲鲂藕牛翭邢赴杆俚亡。研究¨≈砻鳎現/诱导凋亡途径是机体清除肿瘤细胞的重要机制之一。树突状细胞—,枪δ茏钋看蟮淖ㄖ翱乖岢氏赴深入研究的功能及应用,对肿瘤的治疗与预防具有重要意义。某些亚群高表达,导致与其接触的赴蛲觥8醚芯考茨D庹庵稚机制,构建腺病毒载体,将基因转染至中,,为基因治疗肺癌提供实验依据。材料蜗侔⒎瘟郯┬孪时瓯居缮虾3海医院胸外科手术室提供,置预冷至娴腇培养液带回实验室;从以上新鲜标本原代培养人甐⒈4妫捎煤ヌヅQG宓嘌号嘌携带人基因的重组腺病毒—、携带人基因的重组腺病毒—及人外周购自第二军医大学免疫研究所;赴1臼笛室冻存细胞系;标记的兔抗入、籖多克隆抗体、免疫组化试剂盒购自丹麦·公司;嘌杭氨曜继ヅQG骞鹤訥公司;胶原酶Ⅳ、胰蛋白酶以及标记的鼠抗人タ构鹤許公司;/凋亡试剂盒购自在琢鱿赴的诮欣┰觥细胞在培养瓶中贴壁生长占满%~%时,换液,在无血清状态下加入¨《救芤骸跫屡嘌诖似诩涿』闻养瓶我源偈瓜赴雀腥静《尽蠹尤颂牛血清并使其终浓度为%,继续培养~当赴鱿窒赴”湫в而开始脱落时,将病变细胞及培养基收集至离心管中。离心后再用次,最后赴訮悬复冻融各危看允细胞碎裂并释放腺病毒。渣,收集上清即得到腺病毒转染液。用穖滤膜过滤除菌。病毒溶液分装于中,一℃冰箱保存。收集培养至第斓,用少量无血清培养基悬浮,按重复感染指数加入—或—,孵育笤俨棺鉘和标准胎牛血清。笫占⒂—臼笛橹杏米鞫哉。培养至芴濉配体分别是肿瘤坏死因子因子和神经生长因子/超家族成员,牧嫌敕椒公司。重组腺病毒的扩增及保存—及—浮,浓度约觯痬谝和℃条件下反痳胄笃ハ赴的流式细胞术分析基因转染后在中的表达及活性安徽医科大学学报摘要目的探讨基因修饰的树突状细胞对人非小细胞肺癌血管内皮细胞—蛲龅挠跋臁7法用携带有基因的重组腺病毒转染人外周血来源的;从颊呤质跚谐瓯局性嘌鳱—;采用免疫荧光法检测胞膜上谋泶铮籉与甐才嘌魇较赴觳釬对甐蛲龅挠跋臁=峁人外周血来源的成功转染基因;倒置荧光显微镜观察显示胞膜上表达籉峁允綟狣砗蟮猇蛲雎矢哂诙哉兆。结论转染基因的可诱导猇蛲觯;蛑瘟峁┦笛橐谰荨关键词;树突状细胞;非小细胞肺癌;血管内皮细胞;基因治疗中图分类号文献标志码恼卤嗪’———接收基金项目:全军医学科研“十一五计划”资助项目嗪牛作者单位:不找娇拼笱Ы夥啪俅惭г褐琢鲋行模戏泄嗣窠夥啪诙酱笱Ц绞舫ずR皆禾卣锟疲泄嗣窠夥啪诙酱笱锘Ш头肿由镅Ы研室,上海作者简介:周俊平,男,博士,主治医师,责任作者,猰簔.;海
万方数据
避,·,∥×觯痬糜贓管,每管蒷,分别用标记的鼠抗人单抗、同型对照单抗、鳞癌标本中分离、培养甐椒ú握瘴南玁—按个/:接种至孑细胞培养板中,放人℃、号嘌渲信嘌笙赴冢〕装澹治狥组、空白对次;各孔加入穕パ蜓G宸獗找海娣跤楦骺准臃獗找合∈偷亩杂Φ目谷薋抗体,空白对照组加等量的羊血清,驪洗危桓骺准臃獗找合∈的影响按照/凋亡检测试剂盒说明进行。将甐×觯捉又衷軱细胞ド锨澹次;共分椋髯樯个复孑?瞻锥哉组加入等量嘌海現瞻锥哉兆榧尤氲攘斗腖瓺瓺髯橛贔瓺才嘌锨錚洗危偌的兔抗タ寺】固用预冷的次,用稀释好的