文档介绍：色谱柱色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。olumn装填有固定相用以分离混合组分(指混合物(包括溶液)中的各个成分。例如黑***中的炭、硫黄和***钾,ponent;constituent确定平衡系统中的所有各项的组成所需要的最少数目的独立物种称为组分。组分的数目称组分数,在相律中常用符号C表示。组分数与系统中存在的物种数(用符号S表示)有时并不相同。组分数可用关系式C=S-R-R′来确定。其中R为物种之间实际存在的独立的化学平衡关系的数目,R′为某一相中的浓度限制的数目。以水为例,它是单相系统,组分为H2O,故C=1。如考虑水中尚有H3O+及OH-,则S=3,但系统中肯定存在H3O++OH-F2H2O的平衡关系,故R=1,此外在纯水中,必有H3O+的浓度与OH-的相等这一浓度限制关系,故R′=1。因此,C=3-1-1=1,故考虑H3O+及OH-,水仍然是单组分系统。)的柱管。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到最佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使最好的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这就是管壁效应(色谱柱的管壁对溶质随流动相迁移时所产生的柱管中央和边缘部分流速不一致的效应。在空心毛细管柱色谱中,由于管壁效应而使流动相产生流型扩散亦即径向扩散,结果造成区域的扩展。在填充柱色谱中,由于气流流动无规律,因此管壁效应不甚明显。在高效液相色谱柱中,由于流动相具有较大的粘度系数,因而管壁效应显得较为严重。为减少管壁效应的影响,可对色谱柱材料进行选择和对其内壁进行各种处理。参见流型扩散条,区域扩展条。)。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷***塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,~20µm(5~10µm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类,尺寸规格也不同:①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm(,国内有4mm和5mm),柱长10~30cm;②窄径柱(narrowbore,又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn),内径1~2mm,柱长10~20cm;③毛细管柱(又称微柱microcolumn),~;④半制备柱,内径>5mm;⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱长10~30cm;⑥生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。3填料常见的分配柱填料:碳十八柱[1](ODS/C18)、碳八柱(MOS/C8)、碳六柱(Hexyl/C6)、碳四柱(Butyl/C4)、碳一柱(Methyl/C1)、阴离子交换柱(SAX)、阳离子交换柱(SCX)、苯基柱(Phenyl)、氨基柱(Amino/NH2)、***基柱(/Nitrile)常见的吸附柱填料:硅胶柱安装1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。2、为了使色谱柱与仪器系统达最佳的连接效果,应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头,如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱,建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况,避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹