文档介绍：实验五白细胞分类计数(DC)教学目的:掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、白细胞分类技术教学重点:血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点教学内容【原理】将血液制成血涂片,用瑞氏染液染色,根据各种白细胞形态特征分类计数100个白细胞,即可求出各种白细胞的相对比值(百分率)。【器材】、推片、【试剂】--【操作】:(示教)(1)良好涂片标准:1)呈头、体、尾舌形2)血膜厚薄适宜3)两边留有空隙(2)涂片好坏与下列因素有关:1)血滴大小2)推片与玻片之间角度3)(1)染色方法:用蜡笔在血膜两头划线,将血片平放在染色架,上瑞氏染液3~5滴染1分钟,加等量缓冲液混匀染5~10分钟,流水冲去染液,干燥后油镜检查。(2)染色结果判断:1)正常:外观呈粉红色;镜下红细胞染粉红色,可见有碟状感白细胞浆中的颗粒能显示各种细胞的特有色彩;核染紫红色,染色质清楚,粗细松紧可辨。2)偏酸:红细胞和嗜酸性颗粒偏红,白细胞核呈浅兰色或不着色。太酸则只见一片红染,白细胞除嗜酸性颗粒外,均不着色。3)偏碱:细胞呈灰兰色,白细胞颗粒深暗,嗜酸性颗粒变成暗褐色,甚至黑色。中性颗粒也偏粗偏碱(紫黑色),血片过厚的地方呈绿色。:(1)低倍镜观察:选择细胞分布均匀、染色好的部位转油镜下计数100~200个白细胞,求出各种白细胞所占百分比。(2)细胞分布:头体部以淋巴细胞较多尾部和两侧以中性粒、单核细胞较多,片尾部,异常、,即体尾交界处,按一定方式,有规律的移动视野。:(图略)【注意事项】:(1)未干透血膜,染色时易脱落,故血膜应干透再染色。(2)冲洗前,先在低倍镜下观察有核细胞是否着色,否则适当延长染色时间。(3)染液不能过少,以防蒸发,染料沉着在血膜上不易冲掉,影响观察。(4)以流水冲去染液,防染料沉着。(5)染色应