文档介绍：青狐尾草丛生芽诱导探究摘要将青狐尾草作为研究C4光合作用的模式植物,其转化体系还不成熟。由成熟种子胚诱导的愈伤组织再生获得植株效率较低,该试验对比含有不同浓度的6-BA和2,4-D诱导培养基对青狐尾草的丛生芽诱导效果,结果表明:改良后的MS培养基并添加6-BA2mg/L和2,4-。因此,为青狐尾草的遗传转化寻找到一种比较好的转化对象。关键词青狐尾草;丛生芽;6-BA;2,4-D;-5739(2012)22-0153-01青狐尾草是NADP-ME型的C4植物,为单子叶植物[1],是研究C4光合作用方面具有较大潜能的模式植物[2]。但在单子叶植物的遗传转化中,利用组织培养获得再生植株效率很低。因此,该试验探索了丛生芽的诱导浓度。***酸钠溶液灭菌后,将种子稍稍晾干,用药匙均匀撒在MS基本培养基上。(23±2)°。3~4d后种子开始萌发,~,切取幼苗的芽尖放在诱导培养基上诱导丛生芽。根据姜素云等黑麦草丛生芽的培养方法[3],设置了含有不同浓度6-BA和2,4-D的诱导培养基(表1)。MS基本培养基选用康奈尔大学Burtnell实验室培养青狐尾草愈伤组织的MS基本培养基配方。:18h时光照,6h黑暗;光照强度为600~800lx;温度(23±2)°CO2周后形成丛生芽块,可看到明显膨大的叶鞘。将叶鞘和幼叶剥离丛生芽块,计算丛生芽的芽原基数及芽尖数。2结果与分析播种在基本培养基上的青狐尾草种子暗培养3〜5d后,大部分开始萌发。在黑暗条件下,下胚轴伸长较快,,每皿可摆放25个芽尖。在丛生芽的诱导过程中,外源激素的浓度配比非常重要。通过统计诱导出的芽尖数和平均芽原基数,选择效果较好的浓度。通过对比发现,当2,4--BA浓度为2mg/L时,产生丛生芽的芽尖数、平均芽原基数最多。因此,选择培养基G为诱导培养基(表2)。3讨论在诱导培养过程中,2,4-D与细胞分裂有关,6-BA与植株再生细胞的分化有关[4-6]o通过对比不同激素组合的诱导培养基的诱导效果,在不含2,4-D和6-BA的培养基中,芽尖很快褐化死亡;在6-BA浓度低于2mg/L、2,4-,产生丛生芽的芽尖数较少,大部分芽尖死亡;当6-EA浓度高于2mg/L时,不管2,4-D浓度高低,芽尖切口产生的白色细胞团较小,细胞分裂少,进而产生的丛生芽芽原基很少,而且芽尖容易生长成为绿色叶片,不再具有分裂能力;当6-BA浓度适宜、2,4-D浓度过高时,芽尖切口细胞能力较强,容易分裂膨大为一个细胞团,水渍化严重,后期不容易转变为丛生芽,分化能力不强。通过对比发现,当2,4-、6-BA浓度为2mg/L时,产生丛生芽的芽尖数、平均芽原基数最多。因此,选择该激素组合添加入诱导培养基中,其与已有的再生体系相比,青狐尾草丛生芽获得再生植株比较容易,被认为是一个比较好的转化材料[7-9]