文档介绍：紫外分光光度计测蛋白核酸及使用方法2、实验原理蛋白质组成中常含有酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸,在紫外光280nm波长处有最大吸收峰,一定浓度范围内其浓度与吸光度呈正比,故可用紫外分光光度计通过比色来测定蛋白质的含量。由于核酸在280nm波长也有光吸收,对蛋白质测量有一定的干扰作用,但核酸的最大吸收峰在260nm。如同时测定260nm的光吸收,通过计算可以消除其对蛋白质测定的影响。因此如溶液中存在核酸时必须同时测定280nm及260nm的吸光度,才能通过计算测定溶液中的蛋白质浓度。3、仪器与试剂紫外可见光分光光计。未知蛋白质标准溶液,可用结晶牛血清蛋白或酪蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白质含量,根据其纯度配制成1~。%NaCl溶液。4、实验步骤在紫外分光光度计上,将未知的蛋白质溶液小心盛于石英比色皿中,以生理盐水为对照,测得280nm和260nm两种波长的吸光度(A280和A260)。将A280及A260波长处测得的吸光度按下列公式计算蛋白质弄高度C=-,C为蛋白质质量浓度(mg/ml); 本法对微量蛋白质的测定既快又方便,它还适用于硫酸铵或其他盐类混杂的情况,这时用其他方法测定往往较困难。5、实验记录及数据处理测定未知浓度蛋白质溶液的浓度6、实验注意事项(1)石英比色皿比较贵重,且易碎,使用时要小心。(2)测量吸光度时,比色皿要保持洁净,切勿用手玷污其光面。紫外分光光度计测定核酸含量目的和要求1、学****紫外吸收法测定核酸含量的原理。2、掌握利用紫外分光光度计测定核酸含量的方法实验原理DNA和RNA都有吸收紫外线的性质,最大吸收峰在260nm波长处。紫外吸收是嘌呤环和嘧啶环的共轭双键系统所具有的性质,所有嘌呤和嘧啶的物质,都具有吸收紫外线的性质。用1cm光径的比色杯测定核酸的A260nm时,1ug/,,可以用下列公式计算样品的核酸含量DNA浓度(ug/ml)=A260/(ug/ml)=A260/