文档介绍:HelaHela细胞传代培养细胞传代培养??实验目的:掌握动物细胞实验目的:掌握动物细胞培养的基本原理和方法。培养的基本原理和方法。??实验用具:离心管(实验用具:离心管(22支),支),移液枪(每个台面一把),移液枪(每个台面一把),枪头(每个台面一盒),枪头(每个台面一盒),吸管(吸管(44根),培养皿(每根),培养皿(每组组22个)个)??实验药品:实验药品:%胰酶,%胰酶,DD--HanksHanks,,16401640培养基培养基培养板??常用玻璃器皿清洗常用玻璃器皿清洗??浸泡(自来水)、刷洗浸泡(自来水)、刷洗(洗衣粉)、酸泡((洗衣粉)、酸泡(2424小小时)、时)、??流水冲洗、蒸溜水浸泡和流水冲洗、蒸溜水浸泡和冲洗、冲洗、5050℃℃烘干烘干清洁液的配制清洁液的配制??HeLa HeLa 是是Henrietta Henrietta LacksLacks的简称,的简称,Henrietta Lacks Henrietta Lacks 是是一位患有子宫颈癌的一位患有子宫颈癌的美国妇女的名字,在美国妇女的名字,在她死后,该细胞走被她死后,该细胞走被广泛散发到各研究机广泛散发到各研究机构,并无限次地繁殖构,并无限次地繁殖分裂下去。分裂下去。细胞培养的甚本概念细胞培养的甚本概念??传代传代细胞在培养器皿中细胞在培养器皿中生长一定时间后,被生长一定时间后,被分开接种到新的培养分开接种到新的培养器皿中。器皿中。??原代培养原代培养取自体内新鲜组织取自体内新鲜组织并置于体外条件下生并置于体外条件下生长的细胞在传代之前长的细胞在传代之前称为原代培养。称为原代培养。培养细胞的特性培养细胞的特性??贴附生长:必须贴附贴附生长:必须贴附于支持物表面才能生于支持物表面才能生长。见于各种实体瘤长。见于各种实体瘤细胞。细胞。??悬浮生长:悬浮生长:于悬浮状态下即可生长,于悬浮状态下即可生长,不需要贴附于支持物不需要贴附于支持物表面。见于各种造血表面。见于各种造血系统肿瘤细胞。系统肿瘤细胞。每代贴附生长细胞的生长过程每代贴附生长细胞的生长过程??游离期游离期??贴壁期贴壁期??潜伏期潜伏期??对数生长期对数生长期??停止期(平台期)停止期(平台期)游离期游离期??。此时细胞质悬浮期。此时细胞质回缩,胞体呈圆球形。回缩,胞体呈圆球形。??1010分钟一分钟一44小时小时