文档介绍：望咬鱼醚文
新城疫病毒蛋白细胞融合活性位点中保守
氨基酸基因突变分析
王志玉任桂杰温红玲等
为了确定新城疫病毒融合蛋白分子上活性位点中保守氨基分子上与相互作用的特异性区域中的某些保守氨基
, , , 、、
酸在蛋白的细胞融合作用弄清细胞融合的分子机理采用酸在细胞融合中发挥着重要作用对蛋白的折叠加工转运
, , , ,
基因定点突变法创造一个酶切位点用酶切反应初步筛选突变等发挥着不同作用从而影响蛋白的细胞融合作用和或在
, ,
。
株然后用序列分析进一步确定并于真核细胞内进行表细胞表面的表达量
, , ,
达〔染色定性和指示基因法定量检测细胞融合功能荧光摘自《病毒学报》一一一
。,
强度分析检测表达效率情况结果表明第
。
位苯丙氨酸突变成亮氨酸时对细胞融合作用没有显著影响
, ,
和拟巧用为保守序列分别突变为时细胞融合活性只
, 。。
有原来的科下降了细胞表面表达效率没有明显的改变
, , ,
突变为时细胞融合活性明显下降只有原来的而
。,
细胞表面表达效率没有明显的改变为保守序列突变为
, , ,
时细胞融合活性消失说明是一个非常关键的氨基酸对
。
维持蛋白的细胞融合活性非常重要细胞表面表达效率也有所
。, ,
下喇为原来的属于高度保守氨基酸当突变为时
, ,
细胞融合活性消失但经细胞表面表达效率分析证明此突变蛋
,
白未表达于细胞表面证明在细胞浆转运至细胞表面的过程中发
, , ,
生了问题当突变为和时细胞融合活性未发生改变但细
, 。
胞表面表达效率有所下降分别为野毒株的和说明
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张秀芹夏咸柱卫广森等陈国宏季从亮王敏强
,
应用方法扩增出亚洲型口蹄疫病毒的基因继利用对微卫星引物对我国的个地方鸡种进行群体遗传
。,
而构建出真核表达载体一再将含有巨细胞启动子结构及遗传多样性评估结果表明每个座位的等位基因数从
, , ,
的目的基因表达盒连接到穿梭载体△上筛选到不