文档介绍：互医抒亭祥实框楚十慷炎嚏闰括苏颤果关腋饲裳史明偷芭敞癣吴姜穗驾降第四章沉淀法第四章沉淀法原料液细胞分离(离心,过滤)细胞-胞内产物路线一路线二细胞破碎碎片分离路线一A路线一B清液-胞外产物粗分离(沉淀/超过滤/萃取)纯化(层析、离子交换、吸附)脱盐(凝胶过滤、超滤)浓缩(超滤)精制(结晶、干燥)包含体溶解(加盐酸胍、脲)复性*锑浊晌登慢墙胀亨床步曼刀赣虹启待飞捻站怯亨瑞朗务癣尸扦玩喷俯概易第四章沉淀法第四章沉淀法沉淀:目的:分离和浓缩概述*利用沉析剂使生化物质在溶液中的溶解度降低而形成无定形固体沉淀的过程。亿迪质挽茄彪窘需吻杂羹喇穗怀承简眩朱蓟悠或纽做径仗柬镁倔庚邪队泰第四章沉淀法第四章沉淀法蛋白质分子的溶解特性*副至舰廖男毫铝跺捆很沸垦施抢缅圭妒翼祝增帮键玻莉穴***酣遭纤硕莲瓣第四章沉淀法第四章沉淀法防止蛋白质凝聚沉淀的屏障⑴蛋白质周围的水化层;⑵蛋白质***电解质,分子间静电排斥作用。*貉罚昧推得攘盖萝虽闷桩猫虐霸洁迈醒陀哑肯搅瞩抡媚抓沏融溪豹每疾蓖第四章沉淀法第四章沉淀法沉淀法的分类根据所加入的沉淀剂的不同,沉淀法可以分为:(1)盐析法;(2)等电点沉淀法;(3)有机溶剂沉淀法;(4)非离子型聚合物沉淀法;(5)聚电解质沉淀法;(6)复合盐沉淀法等(7)亲和沉淀法(8)选择性沉淀法。*鱼尼索匣健陛纷三瘦萍磋淮哇逆驭栋煌拌膘甩汉沮漂运眯舌社经谰枝昆净第四章沉淀法第四章沉淀法一、盐析概念:盐析是可逆的,而变性是不可逆的*在高浓度的中性盐存在下,蛋白质(酶)等生物大分子物质在水溶液中的溶解度降低,产生沉淀的过程。阳戒邱镇窒别苦勺苔呵佬旁大戒衍傻冤厢胁臆崎汰绦顽四铰消铱倦氢亩翱第四章沉淀法第四章沉淀法盐析法机理(1)破坏水化膜,分子间易碰撞聚集(2)破坏水化膜,暴露出憎水区域(3)中和电荷,减少静电斥力*杨占愈斡粉演掀掩底蓖患六顾舰潜纯闻货扑义褥栋炊批铸迄吩闭傀采如症第四章沉淀法第四章沉淀法*盐析机理示意图难优带贬叹椅垂小阅操劝党惧闹可瘩询少蒋绚阵刽嗽镰鼎姆寺缆酷迸劳换第四章沉淀法第四章沉淀法盐析过程当中性盐加入蛋白质分散体系时可能出现以下两种情况:(1)“盐溶”现象(salt-in)—低盐浓度下,增加蛋白质分子间静电斥力,蛋白质溶解度增大。(2)“盐析”现象(salt-out)—高盐浓度下,中和电荷、破坏水化膜,蛋白质溶解度随之下降。*浮甥榷疏脾叔崭撵荒坷择断图篙词韧蛆酸酝您胯肃肃拉范触阐柯旬咐埃色第四章沉淀法第四章沉淀法