文档介绍：细胞生长曲线的绘制实验报告篇一:实验:计数法测定细胞生长曲线实验内容:计数法测定细胞生长曲线作者:王卫东实验日期:-:学习细胞计数的方法;熟悉测定生长曲线的基本原理、方法,了解其应用。实验原理:一般细胞传代之后,经过短暂的悬浮后贴壁,随后度过长短不一的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期,在达到饱和密度后,细胞停止生长,进入平顶期,然后退化衰老。典型的生长曲线即可分为潜伏期、指数生长期、平顶期及退化衰老四个部分,其中的三个不同生长时相(潜伏期、指数生长期和平顶期)是每个细胞系所共有的特征。通过测定生长曲线,不仅可以了解培养细胞生物学特性的基本参数、测定细胞绝对生长数、判断细胞活力,而且也可用于测定药物等外来因素对1细胞生长的影响。本实验采用计数法测定细胞生长曲线,通过连续对细胞计数(通常为7d,一般应每次计数3瓶细胞取平均值),然后以存活细胞数对培养时间作图,即得该种细胞的生长曲线。仪器、材料和试剂:1、仪器:CO2培养箱、超净工作台、倒置显微镜、血球计数板2、材料:培养瓶、试管、吸管、移液管、废液缸、HeLa细胞、盖玻片、酒精灯3、试剂:培养基(含小牛血清)、%胰蛋白酶实验步骤:1、细胞悬液制备:取生长良好接近汇合的HeLa细胞,胰酶消化,再加新鲜培养基制成细胞悬液后计数。2、接种:根据细胞计数结果,按每瓶5×104个接种细胞(加3mL培养基,×104个)作传代培养(理论上应该每人接种21瓶细胞,每天取3瓶计数,但实际每人只接种7瓶)。3、计数:24h后开始作细胞计数,以后每隔24h计数一次,连续计数7天。4、绘图:根据计数结果,绘制HeLa细胞生长曲线。结果与讨论:1、细胞计数结果如下:122、绘制生长曲线如下:HeLa细胞生长曲线120100细胞数(万/mL)8060402001234567天数3、分析与讨论由上图可以看出,实际所得生长曲线与理论生长曲线有一定差距,主要表现在潜伏期和倍增时间不明显。这可能是由于计数误差造成的。?、理论上应该每人接种21瓶细胞,每天取3瓶计数,但实际每人只接种8瓶,每天仅计数一瓶细胞,无平行样品取平均值来消除误差。?、每瓶细胞也没有重复计数2-33次。?、未做染色,有时死活细胞区分不清,可能导致计数不准。?、由于操作不熟练,胰酶消化时间控制不当(过长或过短)也能导致细胞计数误差。2篇二:MTT法测定细胞生长曲线MTT法测定细胞生长曲线1、取生长状况良好的细胞,常规消化制成单细胞悬液并计数,调整细胞成六个浓度梯度,依次为:5x10、1x10、2x10、3x10、4x10、5x10/ml,均匀接种细胞于96孔细胞培养板,每孔加细胞悬。液200ul,每个浓度组设6个复孔,共接种7块培养板,37?、5%C02浓度,饱和湿度培养箱中(原文来自:.蓬勃范文网:细胞生长曲线的绘制实验报告)连续孵育24/48/72/96/120/148/172小时后。2、每孔加入20ulMTT溶液(smg/m1用PBS<ph=>配),继续孵育4h后终止培养。3、快速翻转培养板,弃去上清液,每孔加入150ulDMSO,振荡10min,使MTT蓝紫色结晶完全溶解。4、用酶联免疫检测仪于490nm处检测各孔的吸光值(OD值),并以未接种细胞只加培养基孔的吸光值为