文档介绍：肌钙蛋白I的检测方法进展心肌肌钙蛋白(cardiactropnin,Tn)是1987年Cummins等诊断急性心肌梗塞(acutemyocardialinfarction,AMI)时首次报道的,肌钙蛋白(Troponin,Tn)是心肌的主要结构收缩蛋白,由三个亚单位组成:肌钙蛋白C(TnC)、肌钙蛋白T(TnT)和肌钙蛋白I(TnI),其中TnI又分为3种亚型:快骨骼肌亚型(fTnI)、慢骨骼肌亚型(sTnI)和心肌亚型(cTnI),个体出生9个月后,心肌中仅存cTnI,无任何亚型,其分子量24kDa,由209个氨基酸组成,有超过40%的氨基酸序列与其他亚型有异源性,且氨基端多延伸出一段32个氨基酸组成的序列,所以cTnI具有高度的心肌特异性,已被临床广泛接受,不仅成为诊断急性心肌梗死的“金标准”,而且已成为心肌疾病病情监测、疗效观察及预后评估的最合适标志物。本文就cTnI的实验室检测方法综述如下:1酶联免疫吸附试验法酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)法已成为一种经典的、被广泛应用于临床的免疫测定技术。此种方法用于cTnI的检测最初是在80年代中期由Cummins等报道的,采用了多克隆抗体竞争抑制法,交叉反应无法消除,存在较大的局限性。1992年Bodor等在此基础上对ELISA法进行了改良,筛选出一对与cTnI亲和力强的单抗,采用单克隆的双抗体夹心法,。1993年Larue等在Bodor等的研究基础上,从28种纯化的单克隆抗体中筛选出一种特异性很强的抗体用于免疫分析,以辣根过氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)取代碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP),~,检测时间30min。目前,ELISA法已成为检测cTnI较为成熟的方法。2化学发光法化学发光免疫分析系统采用了双抗体一步夹心酶免疫分析的方法,以化学发光剂3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酸氧基)苯-1,2-二氧杂环丁氨(AMPPD)为底物,以ALP作为标记物,用单克隆抗cTnIIgG抗体包被的磁性微粒为固相载体,检测时待测抗原与包被在固相载体的抗体及ALP标记的抗体形成1夹心复合物,发光剂AMPPD在ALP催化下脱去磷酸根基团生成具有荧光活性的AMPD,测定其发光强度,通过多点定标曲线计算cTnI浓度。ess微粒子化学发光免疫分析系统,该系统反应快速,,CV<5%,%。何农跃等对化学发光酶免疫测定cTnI分析系统进行了实验条件的优化研究,。电化学发光免疫分析系统是以细小的顺磁性微粒为固相载体,以小分子化学发光剂吖啶酯直接标记抗原或抗体,反应洗涤后,碱性条件下检测其发光强度,从而对cTn-I定量。Bayer公司的ACS-180电化学发光免疫分析系统最具有代表性。,第一家通过美国FDA批准的检测系统是DadeStratusⅡ检测法,后来开发的cTnI分析系统较多是以它作为测定基准。这种方法使用两种cTnI单抗隆抗体,特异性高,