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海洋细菌产普鲁兰酶的发酵条件优化研究阚翡翡,邱永乾,夏涛,司晓亮,董桂秀,管斌,毛相朝牧嫌敕椒工业微生物刘意煜,摘要:利用响应面法对海洋细菌塔产普鲁兰酶发酵条件进行优化。在单因素实验基础上,首先通过两水平的狟杓粕秆〕鲇跋炱章忱济阜⒔的四个显著因素:硫酸铵、硫酸镁、硫酸铁、糯米粉;通过蛩水平的响应面二次回归中心组合实验,对上述影响因素进行优化。实验结果运用砑进行回归分析,最终确定最佳的培养条件:,硫酸铵疞,硫酸镁疞,硫酸铁疞,磷酸二氢钾疞反应温度为℃,转速为关键词:;普鲁兰酶;发酵条件优化;响应面设计普鲁兰酶珽..且恢帜够专一性切开支链淀粉分支点中的仪..糖苷键,从而剪下整个侧枝,形成直链淀粉的脱支酶⋯。在脱支酶中,普鲁兰酶要求的底物分子结构最小,故而它可以分解最小单位的支链,使得淀粉得到最大的利用。这一特性使普鲁兰酶在食品行业中有着广泛的应用,如淀粉生产中与糖化酶并用,可使值高达%ィ岣哂刑烟鞘章市腯,与矸勖并用可生产出痬陨细呗笱刻墙糖粉及痬陨系某呗笱刻墙谄【粕锌起到提高糖的利用率、缩短糖化时间的作用口R此在食品工业中有着重要的用途和良好的市场前目前我国对于普鲁兰酶的研究还处于实验室研究阶段,因此无此酶的生产技术,普鲁兰酶制品主要依赖进口【引。从年和通过产气杆菌发酵获得普鲁兰酶后,国内外就开始了对普鲁兰酶的研究,迄今为止,已经发现许多微生物能够产生普鲁兰酶,,枯草芽孢杆菌腿炔梭菌屑浒OJ细菌汉土辞蚓等。但由于当今工业生产条件嵝裕露所限,到目前为止除了丹麦公司和美国杰能科公司具有生产普鲁兰酶的能力外,大多数的微生物产的普鲁兰酶并无商业价值,它们所产普鲁兰酶不是热不稳定,就是要求是中性的,研究也只停留在理论阶段。这些导致了目前国内外食品工业上用的普鲁兰酶价格非常昂贵,从而限制了普鲁兰酶的应用。本文通过对从海洋环境中筛选得到的产普鲁兰酶菌株辛朔⒔吞件优化,产酶能力大幅提高,以期为普鲁兰酶的规模化生产奠定基础。.┦砸鹬产普鲁兰酶菌株,本实痡..疞,蛋白胨痳钪彰富羁达到景。材料一—泄Q蟠笱称房蒲в牍こ萄г海嗟卷第年傀月痬基金项目:山东省自然基金项目嗪牛篫泄Q蟠笱Ч掖笱葱滦允笛榧苹手钅俊作者简介:阚翡翡,女,硕士研究生,从事食品生物技术研究。·通讯作者::.畂籘:.
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峁胩致工业微生物验室保藏。.嘌种子培养基/:糯米粉,蛋白胨,磷酸二氢钾,,摇床转速,℃,培养发酵培养基∥:糯米粉,蛋白胨,根据实验需要对上述培养几个因素进行必要调整。发酵培养将在一℃甘油管中保藏的菌种接到液体种子培养基的三角瓶中,℃振荡培养的接种量转入盛发酵培养基的三角瓶中,℃振荡培养⒔鸵豪涠忱胄痳∩、磷酸二氢钾、硫酸铵、硫酸镁,硫酸铁均购自天津市瑞金特化学品有限公司;蛋白胨购自北京双旋微生物培养基制品厂;普鲁兰糖购自宇瑞虾化学有限公司。.饕R瞧型可见分光光度计,龙尼柯虾仪器有限公司;偷缛群阄滤」旖蛱┧特仪器有限公司;冷冻离心机,长沙英泰仪器有限公司。普鲁兰酶活力测定采用ú舛ㄆ章忱济傅拿富睿章兰糖产品溶于蒸馏水中,定容至,得浓度为疞的普鲁兰糖溶液。对照组:磷酸缓冲液发酵液;实验组:%℃水浴中反应。反应结束后加入芤悍兴后,流动水冷却