文档介绍：千层塔内生真菌SHB发酵产石杉碱甲条件的研究周树良,杨帆,兰时乐,徐宁,洪亚辉3(湖南农业大学生物科学技术学院,湖南长沙 410128摘要为提高千层塔产黄青霉属内生真菌SHB液体发酵产石杉碱甲的产量,通过单因子和正交试验研究了真菌SHB液体发酵的条件。结果表明,千层塔内生真菌SHB液体发酵产石杉碱甲的适宜条件:温度为28℃,,接种量为12%,种龄为48h,转速为160r/min,发酵时间为8d。在此条件下,。关键词千层塔;产黄青霉属;发酵;石杉碱甲中图分类号 文献标识码 A 文章编号 1005-7021(200903-0032-05HuperzineAProducingConditionsfromEndophyticFungusinSHBHuperziaSerrataZHOUShu2liang,YANGFan,LANShi2le,XUNing,HONGYa2hui(.&Biotechnol.,.,Changsha410128Abstract InordertoincreasetheoutputofHuperzineAbyendophyticfungusSHB(PenicilliumchrysogenumfromHuperziaserrata(Lycopodiumserratum,℃,,inoculationvolumeat12%,strainseedinstarat48h, Huperziaserrata(Lycopodiumserratum;Penicilliumchrysogenum;fermentation;HuperzineA 千层塔Huperziaserrata(Thunbtrey为石杉科石杉属植物蛇足石杉,含有一种生物碱—石杉碱甲。石杉碱甲(huperzineA,化学名:(5R,9R,11E252氨基2112亚乙基25,6,9,102四氢272甲基25,92亚甲环芳辛并22(1H2吡啶酮。易溶于氯仿,溶于甲醇、乙醇,微溶于水,是一种高效、高选择性、可逆性的乙酰胆碱酯酶(AchE抑制剂,具有促进记忆再现和增强记忆保持的作用[1,2]。由于千层塔是一种生长很缓慢的珍贵植物,如果直接从千层塔中提取石杉碱甲,不仅仅提取产量比较低,而且会大量破坏植被,严重影响生态平衡。通过大量实验可以从千层塔里分离一种内生真菌SHB,并在适宜的发酵条件下能够产生与宿主植物相同的活性物质石杉碱甲。为了提高SHB产石杉碱甲的产量,本研究对SHB的发酵条件进行优化,为大规模的工业生产提供依据。1 菌株千层塔产黄青霉属内生真菌SHB(湖南农业大学遗传工程实验室提供。 培养基(g/L ①PDA斜面培养基:马铃薯200,葡萄糖20,琼脂18;②PD液体培养基:马铃薯200,葡萄糖20。 培养方法①种子培养:接一环生长良好作者简介:周树良男,在读硕士研究生。研究方向为分子细胞遗传学。E2mail:a2liang1107@ 3通讯作者。E2mail:******@vip. 收稿日期:2009201209;修回日期:200920221523微生物学杂志 2009年5月第29卷第3期 (250mL中,置于恒温摇床上,180r/min,28℃振荡培养数小时[3];②发酵培养:取种子培养液以一定体积的量接种至装有100mLPD培养基的三角瓶(250mL中,恒温振荡培养[4,5]。 产石杉碱甲发酵条件的研究发酵培养中设置不同的温度(24、26、28、30℃;不同的起始pH值(、、、;不同的接种量(4%、8%、12%、16%,体积比;不同的种龄(36、48、60、72h;不同的摇床转速(120、140、160、180r/min;不同的发酵时间(4、6、8、10d