文档介绍：基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶细胞外基质和基底膜重塑是癌细胞侵袭转移过程中的关键环节,需借助于蛋白降解酶的表达和激活。基质蛋白酶主要有以下数种:丝氨酸蛋白酶类,包括血浆酶原激活剂;半胱氨酸蛋白酶类,包括组织蛋白酶D在内的溶酶体酶;金属蛋白酶类(metalloproteinases),1,。金属蛋白酶类在肿瘤侵袭过程中的作用近年来倍受关注,大量证据表明基质金属蛋白酶,特别是基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)在肿瘤细胞介导的细胞外基质降解中起关键作用,临床研究表明,MMP-2活性和表达的增加与人类多种恶性肿瘤侵袭转移潜能及预后密切相关,2,4,。-2基因及其表达和激活的调节MMP-2基因位于人类染色体16q21,由13个外显子和12个内含子所组成,结构基因总长度为27kb,与其他金属蛋白酶不同,MMP-2基因5′旁侧序列促进子区域含有2个GC盒而不是TATA盒,5,。MMP-2以前酶原的形式由多种细胞分泌,如成纤维细胞、巨噬细胞、内皮细胞和恶性肿瘤细胞等。与其他金属蛋白酶相似,MMP-2分子含有氨基末端片段、金属结合片段及羧基末端片段,其中带有高度保守序列PRCGV/NPD的氨基末端具有一个不配对的半胱氨酸残基,该残基与激活位点的锌原子相互作用介导着MMP-2的前体状态;金属结合片段是公认的锌结合部位,其含旁侧有2个组氨酸的保守序列HE-GH;羧基末端具有类似凝血酶的片段,该片段的具体功能尚未明确。此外,MMP-2还具有一个58个氨基酸残基组成的明胶结合片段,此片段与纤维连接,。目前认为,MMP-2表达和功能的调节发生于转素的明胶结合?型基元相似,6录、分泌、前酶原的激活、细胞表面的结合以及与来源于肿瘤或宿主细胞的MMP抑制剂的相互作用等多个不同的水平。MMP-2的转录调节与其他金属蛋白酶相比具有一定的独特性,如佛波醇酯(phorbolester)通过AP-1位点的介导增加MMP-9和间质胶原酶的表达,而MMP-2基因促进子区域未能测得AP-1位点,5,;转化生长因子-β1(TGF-β1)通过其抑制元素TIE抑制间质胶原酶的表达,7,,而TGF-β1却能诱导人类细胞株转录出高水平的MMP-2信使核糖核酸(mRNA),8,。此外,整合素受体和TN(Tenascin)亦能诱导MMP-2的转录表达。MMP-2在细胞外以前酶原的状态存在,体外实验表明有机***化合物和蛋白酶等均可通过干扰氨基末端不配对半胱氨酸残基与激活位点的锌原子间的相互作用,导致前酶原氨基末端80个氨基酸片段的自身催化降解转化成酶原,获得胶原溶解的活性,激活的酶原进行自身蛋白降解,最终产生具有稳定活性62KD酶,这种激活过程被称为“半胱氨酸开关(cysteineswitch)”假说,9,。由于膜型MMP即MT1-MMP的成功克隆和排序,MMP-2在体内激活的受体机制已被基本阐明。将MT1-MMP质粒转染入Cos-1细胞株内后,MT1-MMP即表达于该细胞株的胞膜,并导致MMP-2酶原的特异性激活,10,。研究发现,MMP-2酶原的激活依赖于由TIMP-2(tissueinhibitorofmetalloproteinase-2)与MT1-MMP结合始动的一个三元复合体的形式,虽然高浓度的TIMP-2抑制MMP-2的活性,11,。MMPS活性