文档介绍：微生物检验技术1微生物检验技术一、环境监测二、无菌检查三、微生物限度检查2一、环境监测无菌检查实验环境的修订修订依据及意义:2010版GMP附录一?无菌药品?和附录三?生物制品?中均规定,非最终灭菌产品各工序关键操作环境应为B级背景下的A级。无菌检查的洁净环境不得低于生产关键区的洁净环境要求!2010年版2015年版(原修订稿)无菌检查:应在洁净度10000级背景下的局部100级单向流空气区域内或隔离系统中进行。无菌检查:应在洁净度B级背景下的局部A级单向流空气区域内或隔离系统中进行。3一、环境监测微生物限度检查实验环境的修订2010年版2015年版(原修订稿)微生物限度检查:应在洁净度10000级背景下的局部100级单向流空气区域内进行。微生物限度检查:应在受控环境下(不低于D级)的局部不低于B级单向流空气区域内进行。4一、环境监测GMP2010年版对洁净度的规定及确认标准洁净度级别悬浮粒子最大允许数/立方米浮游菌cfu/m3沉降菌(?)cfu /4小时(2)表面微生物静态动态接触(?)cfu /碟5指手套cfu /手套≥≥(2)≥≥?3520002?0010555?级3520002?0035200002?0001005025?D级35200002?000不???不???20010050?5一、环境监测药品洁净实验室监测项目及频次(参考)受控区域洁净度级别采样频次监测项目无菌隔离系统内部每次实验空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物(手套)相邻外部每月一次空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物微生物洁净实验室无菌检查(以A/B级或A/C级为例)每次实验空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物(手套及操作服)微生物限度检查以A/C级为例)每周一次空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物(手套及操作服)C级每季度一次空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物D级每半年一次空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物6一、环境监测?培养基?胰酪大豆胨琼脂(TSA)细菌、酵母菌和霉菌的生长必要时可加入添加剂消除和减少消毒剂和抗生素的作用。,?沙氏葡萄糖琼脂(SDA)(当监测结果有疑似真菌或考虑季节因素影响时)培养时间: ChP(2015) GB/T 16293-2010 TSA: 3-5天不少于2天 SDA: 5-7天不少于5天7?、?:环境、设备、:品种、制备、灭菌、贮存、:直接接种法、:供试品的处理、对照试验、直接接种法、薄膜过滤法、?、?菌检查??1)对象:无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定,仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。9?、?菌检查?2)环境:应在无菌条件下进行,试验环境必须达到无菌检查的要求,(《9203 药品微生物实验室质量管理指导原则》:环境洁净度B 级背景下的局部A 级洁净度的单向流空气区域内或隔离系统中进行)【 10版:应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行】,其全过程应严格遵守无菌操作,防止微生物污染,防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。A 级和 B 级区域的空气供给应通过终端高效空气过滤器(HEPA)。10