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·卫生检验与毒理·免疫亲和柱一高效液相荧光检测牛奶和奶粉中的黄曲霉毒素蔡梅,吉文亮,刘华良,马永建江苏省疾病预防控制中心,南京黄曲霉毒素属黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的一种,摄入后主要存在于动物的乳、肾脏、肝脏、蛋、肉和尿中,其中以乳中最引起人们关注J澜缥郎橹拾┲⒀芯炕/獳形狪类致癌化合物,许多国家也确定了乳和乳制品中的的法定限量标准。目前的测定方法有薄层层析法、液相色谱一串联质谱法、高效液相法、荧光分光度法、双流向酶联免疫法等1〔悴阄龇ú僮鞣彼觯氖保跋煲素较多且仅能半定量;液相色谱一串联质谱法准确性和灵敏度高,但仪器昂贵,基层实验室均未配置。现运用免疫亲和柱净化高效液相荧光检测对牛奶和奶粉中进行分析测定,建立了一种操作简单、灵敏度高、特异性好、适于大样品量检测的方法。牧嫌敕椒仪器与试剂高效液相色谱仪:型,荧光检测器拦步萋坠;免疫亲和柱:,北京华安麦科生物技术有限公司;固相萃取真空仪;低温高速离心机;氮吹浓缩仪;漩涡混合器;一次性注射器;标准溶液:译,篖,乙腈状。色谱条件色谱柱:,莔恢拢;荧光检测器:激发波长,发射波长;流动相:乙腈:水一:;流速:/唤浚荓。样品处理牛奶:取样品,以#痬,℃,离心后弃去上面漂浮的脂肪层,澄清液待测;脱脂奶直接过玻璃纤维滤纸,收集滤液约待测。.谭郏撼迫酚谌巧掌恐屑铀解,℃超声淙粗潦椅露ㄈ葜#痬,℃离心ド厦嫫〉闹肪层,澄清液待测。.崛∮氪炕航淮涡注射器与亲和柱顶部连接,再与固相萃取真空仪连接起来,,调节真空系统,控制试样/奈榷魉俟旰蠹水,以稳定流速洗柱,最后抽干亲和柱。取下亲和柱,加入乙腈,以自然滴落的方式收集洗脱液,℃下氮气吹干,立即加入%乙腈,漩涡四ど匣标准曲线的绘制取痬曜既芤容量瓶中,用%乙腈溶液定容,浓度为./。取此标准溶液....,用%乙腈溶液稀释至刻度,溶液浓度分别为、、、/7直取肚苑迕婊团ǘ然嬷票曜记撸咝曰毓江苏预防医学年碌淼期目的建立一种快速测定牛奶和奶粉中黄曲霉毒素的方法。方法样品经离心、过免疫亲和柱,以乙腈水为流动相,测定牛奶和奶粉中,荧光检测器定量。结果该法浓度在豨/段谖斩瘸柿己孟咝怨系,相关系数为;%;最低检出限牛奶/⒛/。结论该法快速、简便、准确、可靠,简化了现有国标法中的操作步骤,适合于牛奶和奶粉中的定量分析。免疫亲和柱;高效液相;黄曲霉毒素;牛奶;奶粉文章编号:———/。以以结果于琒,,琋摘要:关键词:中图分类号:.文献标识码:.×.簂痡..—...基金项目:江苏省科技支撑计划一社会发展唤帐临床医学中心呒际跗教作者简介:蔡梅,女,江苏南京人,副主任技师。主要从事食品理化检验工作。···
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黼瓿,搿蠹器嚣冕,脚ィ一~八八方程为..,相关系数为。在~.莋/段冢珹呐ǘ扔敕迕婊渚哂辛好的线性关系,图谱见图7椒ㄗ畹图斐鱿蓿号D涛襣//。精密度结果配制标准溶液肚疞,连续进样危迕婊喽员曜计ú,分别测定样品牛奶和奶粉中含量,再分别加入、、雠ǘ鹊呐;撬岜曜既芤鹤黾颖昊厥帐验,每一浓度做銎叫校厥章史段%~.ィ骄%,⒈,图谱见图⑼。致属于黄曲霉毒素一类结构相似的化合物中的一种,其基本结构为一个二呋喃环的氧杂萘邻酮。溶于氯仿、乙腈、甲醇和水等多种有机溶剂,