文档介绍：生物化学与生物物理进展
ProgressinBiochemistryandBiophysics
2009,36(10):1348~1355
基于凝集素芯片的不同转移潜能
肝癌细胞膜蛋白糖谱比较*
王念1,2) 康晓楠 1,2) 刘银坤 1,2)** 郭坤1) 崔杰峰 1)
孙瑞霞 1) 陈洁1) 赵燕1) 陈培1)
(1)复旦大学中山医院肝癌研究所,上海 200032;2)复旦大学生物医学研究院癌症研究中心,上海 200032)
摘要评估采用凝集素芯片技术寻找肝癌细胞表面侵袭和转移相关特征性糖谱的适用性. 首先选取一对模式细胞株(中华仓
鼠卵巢细胞 CHO 和其 N- 乙酰葡萄糖胺转移酶缺陷株 Lec1)验证凝集素芯片系统的可靠性. 然后通过凝集素芯片比较正常
玉
肝细胞 L02、非转移肝癌细胞 Hep3B、高转移肝癌细胞 HCCLM3 的细胞表面糖谱,同时采用细胞凝集素组织化学的方法验
证芯片结果. 细胞 Hep3B 和 L02 相比,对凝集素 PHA-L、ConA、AAL、MPL 的亲和作用增强而对凝集素 WGA 的亲和作用
减弱,提示在肝癌细胞表面可能出现了增多的复杂寡糖分支、高甘露糖、末端岩藻糖、黏蛋白 T 抗原和减少的 N- 乙酰葡萄
糖胺和/ 或多价唾液酸结构. 细胞 HCCLM3 和 Hep3B 相比,对凝集素 LCA、MAL- 、MAL- 、WGA、PHA-E 的亲和作
玉域
用增强而对凝集素 RCA-I 的亲和作用减弱,提示在高转移肝癌细胞 HCCLM3 的表面可能出现了增多的核心岩藻糖、唾液酸
(主要是 2-3 链接方式)、N- 乙酰葡萄糖胺、平分型 Ac 结构以及减少的末端 1-4 链接半乳糖结构. 细胞凝集素组织化
琢茁
学的结果支持芯片结果. 研究证明,凝集素芯片技术是解析生物学进程中糖谱改变的适用工具.
关键词凝集素芯片,肝癌,糖,转移
学科分类号 ,Q53 DOI: .
肝癌是世界上恶性程度最高的肿瘤之一,由于集素芯片,包含 13 种和肿瘤进程相关的凝集素.
较高的转移率和复发率,病人 5 年生存率低,预后在我们早期工作中,用它成功地区分出不同来源的
较差[1]. 包括肝癌细胞在内,绝大多数的肿瘤细胞甲胎蛋白 AFP 的 N- 糖谱[4]. 在本次工作中,采用
膜蛋白都经过糖基化修饰,而且在肿瘤的侵袭转移凝集素芯片比较了正常肝细胞、非转移肝癌细胞以
进程中,某些糖基化修饰会随着疾病进程发生改及高转移肝癌细胞表面糖结构,寻找肿瘤侵袭和转
变,因此,寻找这些特征性改变的糖链结构对于肿移相关的特征性糖链谱图.
瘤的早期诊断、进程监测、预后评估以及治疗靶点
材料与方法
的寻找都能提供重要信息. 虽然当前已经有许多糖 1
分析技术用于寻找糖修饰的改变,比如质谱技术 1援1 材料
(massspectrometry)、亲和色谱技术(affinity 凝集素购自美国 Vector 公司,
chromatography)、核磁共振(ic Cy3-monofunctionaldye 购自美国 GE 公司. 天然膜
resonance)