文档介绍：生理学实验手册EXPERIMENTMANUALFORPHYSIOLOGY专业及班级:学号:姓名:组别:天津医科大学临床医学院生理学实验室实验一标本制备及BL-410生物机能实验系统的使用Experiment1PreparationofspecimensandtheuseofBL-410biologicalfunctionofexperimentalsystem同组人姓名(thenameofthestudentsinthesamegroup)。日期(date):年月日【实验目的】掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的操作技术,为此后有关的神经肌肉实验打下基础;熟悉BL-410生物机能实验系统的使用。【实验原理】蛙或两栖类动物的一些基本生命活动及生理功能与温血动物近似,而且其离体组织需要的生活条件非常简单,易于控制和掌握。因此在生理学实验中,坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常用的对象,经常用来研究神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩的特点、兴奋性的周期性变化等。【实验器材和药品】蛙类手术器械一套(金属探针1根,粗剪刀、眼科剪刀各1把,圆头镊子、眼科镊子各1把,玻璃分针2根),蛙板和玻璃板各1块,培养皿,滴管,废物缸、锌铜弓,丝线,棉花;任氏液。【实验对象】蟾蜍或蛙。【实验方法和步骤】(常用的有三种方法)(1)俯式捣毁法:是最常用的方法。以左手持蟾蜍,将其腹面朝向手心,前肢夹在食指和中指之间固定,后肢夹在无名指和小指之间固定,并用拇指按压蟾蜍头部使之下俯30~40度角;然后右手持金属探针沿蟾蜍头部的中线下划,可触及一凹陷处即为枕骨大孔。将探针从枕骨大孔垂直刺入1~,再向前刺入颅腔,左右搅动(可感觉到探针与颅骨壁的碰击),破坏脑组织;再将探针退回至进针处,但不拔出而是转向后方刺入椎管,破坏脊髓。(2)仰式捣毁法:将蟾蜍仰卧于蛙板上,拉开下颌,右手持探针在颅底两眼之间向前下刺入颅腔,用探针在颅腔内向四周捣毁脑组织,然后将探针退至粘膜下,针尖向后平行刺入椎管内以破坏脊髓。(3)横断脊柱后捣毁法:左手持蟾蜍,右手持粗剪刀,在两腋窝稍下横断脊柱,然后在脊柱呈白色的脊髓断面处,向上插入探针破坏脑,再向下插入探针破坏脊髓。以上方法破坏脑和脊髓成功后,蟾蜍出现四肢(尤其是后肢)瘫软,并常有尿失禁现象。(~2cm处)剪断脊柱,用左手握住蟾蜍后肢,拇指按压骶骨,使蟾蜍头部及内脏自然下垂;避开腰骶神经丛后,右手用粗剪刀沿脊柱两侧剪开腹壁,在耻骨联合处将躯干上部及内脏剪掉,弃入废物缸内。(小心勿伤神经),右手捏住脊柱断端的皮肤边缘,逐步向下剥去全部后肢皮肤。将剥好的标本放置在盛有任氏液的培养皿中,或置于洁净的玻璃板上,滴加任氏液备用。然后洗手并清洗用过的手术器械。,避开坐骨神经,用粗剪刀剪去向上突出的骶骨,沿脊柱正中线将脊柱从上向下分成两半,再从耻骨联合中央剪开(注意:剪开时应避免剪刀走“S”形,以保证坐骨神经的完整),将已分离的两腿浸入任氏液备用。亦可在游离大腿部位的坐骨神经后再分离两腿。,用玻璃分针在大腿背面内侧沿坐骨神经沟(股二头肌与半膜肌之间)分离肌肉,暴露坐骨神经。向上将梨状肌及其附近的结缔组织剪断,然后用玻璃分针沿脊柱自上而下轻柔游离坐骨神经腹腔部(坐骨神经呈亮白色束状),用眼科剪刀剪断神经的所有分支,在近脊柱处穿线结扎,从脊柱根部将坐骨神经剪断。也可以不结扎、不剪断神经,而保留一小块与神经相连的脊柱(×),供握持神经用。,切断膝关节周围的大腿部肌肉,把股骨刮干净,然后剪去股骨小头并保留余下的股骨(约1~),以便在固定神经肌肉标本时使用。(或小剪刀)在跟健下方穿一洞,向上游离腓肠肌至膝关节处。穿线结扎腓肠肌跟健,左手提线,在结扎线远端剪断跟健。将膝关节以下的小腿其余部分全部剪去。以上过程应注意避免损伤神经,并随时滴加任氏液。至此即完成一个坐骨神经-腓肠肌标本的制备。:用被任氏液浸湿的锌铜弓接触坐骨神经,如腓肠肌迅速收缩,则表示标本的兴奋性良好,可供有关神经肌肉生理实验用。【实验要求与注意事项】,了解蟾蜍腿部的局部解剖及坐骨神经的走行。(尤其是眼后的大腺体),防止其分泌物溅入眼内或污染标本。,并及时清洗手及用过的器械;已剥去皮肤的组织应避免接触蟾蜍皮肤或其他不洁物;以防标本被污染。、肌肉时不可过度