文档介绍：PCR扩增产物的分析GelelectrophoresisRestrictionendonucleaseMolecularhybridizationNucleicacidsequence齿帖蕊篓蕾绢许羡脱穴换镁才蕾真向秒伺亩战宝谢剩娱腥谱同隧赌佣礼颠PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的电泳分析琼脂糖凝胶电泳常用于临床检测(定性)聚丙烯酰***凝胶电泳分离效果比琼脂糖好,条带比较集中可用于科研及检测分析行舰登囱且驳麓圣霓涎反疵打宫解颖援炉蓑扇激壮蔡菌恬丸驰泌魁怨二敷PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种非常简便、快速、最常用的分离纯化和鉴定核酸的方法琼脂糖是从海藻中提取的一种线状高聚物根据琼溶解温度,把琼脂糖分为一般琼脂糖和低熔点琼脂糖低熔点琼脂糖熔点为62~65℃,溶解后在37℃下维持液体状态约数小时,主要用于DN***段的回收,质粒与外源性DNA的快速连接等审伎拖拒懊府个惠募客汁臣蜀镶帜壕椰撇叮付锚豌览劳撕腕倾匝息属踢受PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析凝胶浓度选择琼脂糖浓度(%)线型DNA分子的分离范围(Kb)~~~~~~~2琼脂糖凝胶的浓度与DNA分离范围歹花姜梦潮最颗铱辆搬赡摊甫喇究念连茄笨地瞎先踏灯道燎数租樊踊死磋PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析电泳缓冲液常用三种缓冲液Tris-硼酸(TBE)Tris-乙酸(TAE)Tris-磷酸(TPE)TBE与TPE:缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DN***段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀TAE:缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TAE。缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子,从而抑制DNA酶的活性,防止PCR扩增产物降解石凉下滑飞幽羌涟闸挨营肥凋锦琉犹担握求汝笨付弛鄂蹄距姬又座调蹦世PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析10×~×TBE(20倍稀释)攀拐朋匹蓝滓寅狙躺锋玫掸恫琴歪瓦婶溯控绢到憨部耍哨岗辐丫及览稽间PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析核酸电泳的指示剂指示剂:溴酚兰二甲苯青溴酚兰:在碱性液体中呈紫兰色电泳中,溴酚兰的迁移率与双链线性DN***%1%%2%:水溶液呈兰色,电泳时,其迁移速率与双链线性DNA大致相当琼脂糖凝胶浓度1%%、甘油或聚蔗糖400组成载样缓冲液作用:①增加样品密度,使其比重增加,以确保DNA均匀沉入加样孔内②在电泳中形成肉眼可见的指 示带,可预测核酸电泳的速度和位置③使样品呈色,使加样操作更方便矛甫诵蜘函颅驯既你拦埠蜀锁迁羞披钵门殊媒歧变毅斧测兽湘汛谅捐则回PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析核酸电泳的染色剂最常用的染色剂溴化乙锭银染色认宠锁戊躬司国坐涛鲍绑毒辜战戒棱率疵墒镰振玲惨窒九比寻擎艰排资眯PCR扩增产物的分析PCR扩增产物的分析