文档介绍：EBV LMP2 B细胞表位的预测、克隆、表达及其融合蛋白免疫原性的初步研究温州医学院2004级硕士学位论文答辩答辩人:欧琴导师:张丽芳教授夏克栋教授专业:◆◆研究背景研究背景◆◆研究目的研究目的◆◆研究方案研究方案◆◆结结果果◆◆分析与讨论分析与讨论◆◆结结论论研究背景EBEB病毒病毒(Epstein-Barr (Epstein-Barr virua,EBVvirua,EBV))属于属于γγ疱疹病毒科。引起的主要疾病包括传疱疹病毒科。引起的主要疾病包括传染性单核细胞增多症、移植后淋巴细胞染性单核细胞增多症、移植后淋巴细胞增多症增多症(PTLD)(PTLD)、霍奇金病、、霍奇金病、BurkittBurkitt淋巴淋巴瘤以及鼻咽癌瘤以及鼻咽癌(NPC)(NPC)。。研究背景肿瘤亚型EBV阳性率表1 EBV相关的增生性疾病BurkittBurkitt淋巴瘤淋巴瘤E-BL 100%E-BL 100% S-BL 15%-85% S-BL 15%-85% AIDS-BL 100% AIDS-BL 100%NPC NPC 低分化或未分化低分化或未分化100100%%霍奇金病霍奇金病mc/ld 80%-90% mc/ld 80%-90% ns 30 ns 30%%TT细胞淋巴瘤细胞淋巴瘤fatal IM 100% fatal IM 100% AILD 40% AILD 40%淋巴母细胞瘤淋巴母细胞瘤fatal IM 100%fatal IM 100%与器官移植相关与器官移植相关100100%%与与AIDSAIDS相关相关7070%%-80%-80%研究背景?LMP2不是转化基因,维持EBV潜伏感染。?LMP2成为NPC等EBV相关肿瘤治疗的理想靶抗原之一。研研究究背背景景?表位疫苗是目前研制感染性疾病与恶性肿瘤疫苗的方向。?多表位疫苗能选择性诱导多价、多特异性应答和控制免疫应答类型。研究背景NPC患者血清中能检测LMP2抗体。B细胞表位的研究为单克隆抗体的制备提供更充分的依据,以B细胞表位为基础的多肽抗原可用于血清学检测。研究目的1. 预测EBV LMP2的B细胞表位,可为其单克隆抗体的制备及表位疫苗设计等研究提供理论依据。2. 分别构建含预测B细胞表位多肽的原核重组质粒,采用6个组氨酸标签()表达表位融合蛋白,并用Ni-NTA树脂亲和层析法分别纯化表位融合蛋白。3. 将纯化的蛋白分别免疫小鼠,检测其诱导小鼠产生的特异性IgG抗体;选择抗原性强的融合蛋白作包被抗原,用ELISA检测NPC组