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沙门氏菌检验.doc

上传人:dongmengguoji 2020/1/28 文件大小:31 KB

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沙门氏菌检验.doc

文档介绍

文档介绍:沙门氏菌检验天气:心情:沙门氏菌及检验人沙门氏菌病有四类综合症:沙门氏菌病;伤寒;非伤寒型沙门氏菌败血症和无症状带菌者。沙门氏菌胃肠炎是由除伤寒沙门氏菌外任何一型沙门氏菌而所致,通常表现为轻度,持久性腹泻。伤寒实际上是由伤寒沙门氏菌所致。未接受过治疗的病人致死率可超过10%,而对经过适当医疗的病人其致死率低于1%,幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。这些无症状携带者不显示发病症状仍能将微生物传染给其他人(传统的例子就是玛丽伤寒)。非伤寒型沙门氏菌败血症可由各型沙门氏菌感染所致,能影响所有器官,有时还引起死亡。幸存者可变成慢性无症状沙门氏菌携带者。一、致病性沙门氏菌胃肠炎,潜伏期一般6-72小时,主要症状为恶心、呕吐、腹绞痛、腹泻、发热寒颤头痛。病程一般1-2天或更长。感染剂量为15-20个菌,死亡率达1-4%。最易感群体是年幼儿童、虚弱者、年长老人、免疫缺陷者等。污染源主要是人和家畜的粪便,沙门氏菌常存在于动物中,特别是禽类和猪。在许多环境中也有存在。从水,土壤,昆虫中,从工厂和厨房设施的表面和动物粪便中已发现该类细菌。它们可以存在于多类食品中,包括生肉,禽,奶制品和蛋,鱼,虾和田鸡腿,酵母,椰子,酱油和沙拉调料,蛋糕粉,奶油夹心甜点,顶端配料,干明胶,花生露,橙汁,可可和巧克力。沙门氏菌属也是嗜温性细菌,在中等温度,中性pH,低盐和高水活度条件下生长最佳。。兼性厌氧,对中等加热敏感。同样,该菌属能适应酸性环境。通过卫生以防止二次污染;蒸煮;巴氏消毒等控制。正常家庭烹调,个人卫生可以防止煮熟食品的二次污染,以及控制时间和温度一般都能充分防止沙门氏菌病的发生。二、检验因沙门氏菌是最常见的食源性细菌病原体,因此在本节中重点介绍沙门氏菌的检验。沙门氏菌是食物传播病原菌中研究最活跃的细菌。从食品中分离和鉴定沙门氏菌,当前通用的方法学分5个步骤:-第一步使食物样品在含有营养的非选择性培养基中增菌,使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。-在含选择性抑制剂的促生长培养基中间,样品进一步增菌的一个步骤。此培养基允许沙门氏菌持续增殖,同时阻止大多数其他细菌的增殖。-这一步采用固体选择性培养基,抑制非沙门氏菌的生长,提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。-排除大多数非沙门氏菌。也提供了沙门氏菌培养物菌属的初步鉴定。。这五个步骤代表理想状况。不过一个有经验的检验员,可能在一个或几个步骤中看出特性和差别。目前检验食品中的沙门氏菌是按统计学取样方案为基础,25g食品为标准分析单位。三、从食品中分离沙门氏菌样品的制备下面的方法是以25g样品为检测单位,样品:肉汤为1?9的比例。除非另有说明,根据混合程度,加足够的肉汤保持1?9的比例。对不需准确称量检测的样品,例如:田鸡腿,可参看特定方法说明。1、干蛋黄、干蛋白、干全蛋、液奶(去脂牛奶,含2%脂肪牛奶,全脂奶,和脱脂奶)、粉状调制食品(蛋糕,甜饼,炸面圈,饼干和面包)、婴儿食品、口食或软管进食含蛋的食品:检验前的冷冻样品最好不要解冻。如果冷冻样品必须软化以获取待检测部分,则尽可能迅速的解冻所需部分,使竞争菌数少增加或降低沙门氏菌的可能损伤。解冻需在45?以下,有自动调温器自控的水浴锅内不断搅拌进行15min或在2�5?,18小时内解冻。无菌操作称取25g样品,放入灭菌带螺旋帽的广口瓶中(500mL)或其他合适的容器内。非粉状的样品,加入225mL灭菌乳糖肉汤。如果制品是粉状,加入约15mL灭菌乳糖肉汤,用灭菌玻璃棒,匙或灭菌压舌器搅拌,使成均匀悬液。再加3份乳糖肉汤10mL,10mL,190mL,使总量为225mL。充分搅拌,直到样品完全悬浮没有团块为止。盖紧瓶盖在室温静置60min。振摇使充分混匀,用试纸测定pH值。?。在测定最终pH前要盖紧瓶盖并充分混匀。然后将瓶盖旋松约1/4圈,置35?培养24?2小时。以下步骤按四,1-10进行。2、蛋类:A、含壳蛋:用硬刷子在水流下刷洗蛋。%十二烷酸磺酸钠(SDS)的200ppm***离子溶液中浸泡30min。%次***酸钠到含1gSDS的992mL蒸馏水中,制备200ppmcl-/%SDS溶液。这种消毒剂需在使用前临时制备。无菌操作打开蛋,使用灭菌的蛋分离器,弃去蛋白。无菌操作称取25g蛋黄到灭菌的500mL锥型瓶或其他合适容器内。加225mL胰胳胨(胰化物)大豆肉汤(TSB),并振荡充分混匀。在室温下静置60分钟。振摇使其充分混匀,用试纸测定pH值。?,置35?培养24?2小时,以下步骤按四,1-10继续。B、