文档介绍：上海第二医科大学
博士学位论文
CTGF与肾间质纤维化的相关性研究及TGF-β对其表达的调控作
用
姓名:赵青
申请学位级别:博士
专业:内科学(肾脏病)
指导教师:陈楠

兰垄星三躞兰壁兰兰笙垄与肾间质纤维化的相关性研究及瓸对其表达的调控作用中文摘要肾小球硬化和肾小管间质纤维化是终末期肾病的突出表现,尤以后者对终是人们的研究热点,其中转化生长因子之一。在瓸诱导下,可由成纤维细胞等细胞分泌,并介导瓸的促细胞增殖和细胞外基质因此已成为这一研究领域中新的热点。本课题重点探讨与肾小管间质纤维化的关系及云浔泶锏牡骺刈饔谩本研究首先观察在原发性’肾小球肾炎小管闽质病变中的表达及其根据小管间质病变分级分为四组:例,级例,可能在肾间质纤维化形成中起重要作用。作为瓸的下游因子,⑸疾病的进展和预后影响较大。在肾小管间质纤维化发生中,细胞因子网络始瓸蝗衔J侵孪宋闹匾R蜃印=、家族成员,合成等作用,与肾间质纤维化之间的关系。我们选择不同类型原发性肾小球肾炎患者例,例。应用免疫组化方法观察四组中、瓸⑾宋拥鞍,,并将表达水平与患者血肌酐湍谏◆宄进行比较。同时应用原位杂交方法观察在肾小管间质中的表达部位。结果发现肾小管上皮细胞和间质成纤维细胞是间质中的主要来源。在慢性小管间质损伤区,蛋白质分子过度表达,.。上述结果表明,本研究第二部分从细胞水平探讨瓸对肾间质中分泌合成的影响。,.和蛋白印迹际酰鄄霻一盏既近端肾小管上皮细胞系一赴鸆和蛋白质分子合成情况。同时观察在瓸饔孟律鲂」苌掀は赴男翁谋洌⒂τ妹庖哂ü饧觳细胞中交〖《。结果发现一赴谢×康腃和蛋白质分子表达,在.。此外,与虲—谋泶锪砍烧,
刺激浓度是/,最佳刺激时间是小时。我们同时观察到,弧为进一步了解甧诱导分泌合成的机制,本研究第三部分从转,将其瞬时转化。赴ü觳庥ü馑孛傅幕钚苑从矯的刺激时间种即可使活性呈增加趋势;最佳刺激浓度是影响。灾黾親中的基础活性,并在一定浓度范激下,其表达量显著增加,并呈剂量依赖和时间依赖效应。淖罴/稍は翲细胞由立方形铺路石样逐渐转变为梭形长条样,免疫荧光检测见梭形细胞胞浆中有大量甋表达,提示细胞发生了转分化。开始增加和达到高峰的时间种雍∈。上述结果表明,直接诱导体外培养的肾小管上皮细胞分泌合成,单纯的鲂」苌掀は胞可以大量表达,并不一定在转分化为肌成纤维细胞之后。录水平探讨瓸訦细胞中基因启动子活性的调控作用,以及丝裂原激活蛋白激酶.,揪抖愿作用的影响。我们首先构建含有人类基因启动子的报告基因重组体基因启动子活性。结果证实瓸约亮恳览岛褪奔湟览捣绞缴系鱄细胞中基因启动子的活性。较小浓度的瓸/徒隙/,最佳刺激时间为ü。应用蚐直鹛匾煨抑制途径的胞外信号调节蛋白激酶珽贰⒌,/罚颐欠⑾在细胞中这三条途径对系鰿舳踊钚缘淖饔糜胁煌围内./,但以剂量依赖方式显著抑制瓸募せ钚вΑ6对基础状态和瓸碳は翪蚱舳踊钚晕抻跋臁I鲜结果表明,约亮恳览岛褪奔湟览捣绞缴系鱄赴蠧因启动子活性,在转录水平调节表达。,通过本研究可得到以下三条结论:⑺孀怕陨鲂」芗渲什”涑度加重,表达量显著增加,它可能在肾间质纤维化形成过程中起重要作用。肾小管上皮细胞是肾小管间质中表达的主要细胞。⑻逋馀嘌的人近端肾小管上皮细胞系一杀泶锘×康腃和蛋白质分蛊浔泶锪肯灾黾樱⒊始亮恳览岛褪奔湟览敌вΑ缮系鱄细胞中基因启动子活性,主要在转录水平调但大部分细胞转分化的时间∈明显晚于和蛋白质表达子,
节表达。途径的泛蚿通路可影响的这一调控作用。因此,深入研究瓸诱导表达的信号转导途径,并阻断表达或抑制其活性,可能为探索抗肾间质纤维化治疗提供新的关键词:肾间质纤维化结缔组织生长因子转化生长因子一肾小管上皮细胞启动子思路。上海第二医科大学薄士学位论文
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第一部分结缔组织生长因子在肾间质纤维化中的表达及其意义言材料和方法引/珻平均值.±.痬。在各种原因所致的慢性肾脏病中,肾间质纤维化程度与’肾功能减退密切相关,它是衡量肾脏疾病慢性进展的重要指标