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灰毡毛忍冬新品种ISSR分子标记及组织培养的研究.pdf

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灰毡毛忍冬新品种ISSR分子标记及组织培养的研究.pdf

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中南林业科技大学作者签名:万迕唧沙∥年否月歹一作者签名:;必导师签名:鞠撒秀幻忡伦ㄈ沙/少年卵迕学位论文版权使用授权书学位论文原创性声明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文保密口,在年解密后适用本授权书。的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件或电子版,允许论文被查阅或借阅。本人授权中南林业科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于:不保密√口。肽谝陨舷嘤Ψ娇虼颉啊獭本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文获得中南林业科技大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式表明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的成果作品,也不包含为
、大银花等,是忍冬科忍冬属多年生半常绿小灌木植物,其花蕾绿原酸含量在全国各种药用忍冬植物中最高,是湖南、重庆、贵州等地药用忍冬植物生产的主栽品种。虽然我国药用忍冬植物产业取得了长足的发展,但是,仍存在着良种缺乏,品种混杂,干花产量和药用活性成份绿原酸含量低,繁殖技术落后,育苗周期长,繁殖系数小等系列问题,从而制约了我国药用忍冬植物产业健康可持续发展。本文以灰毡毛忍冬新品种‘金翠蕾’、‘银翠蕾’和‘白云’为研究对象,研究了灰毡毛忍冬新品种分子标记和组织培养,系统地分析了新品种组织培养增殖分化及生根过程中的内源激素、内源多胺的变化规律和调控作用,旨有效地从分子水平鉴别灰毡毛忍冬新品种,建立新品种高效组培快繁技术体系,促进我国药用忍冬植物产业又好又快发展。主要研究结果如下:艺泵潭缕分諭肿颖昙堑难芯俊R曰艺泵潭镀蜃镈为模板,研究了退火温度、酆厦傅挠昧考澳0錎、引物、浓度等忠蛩囟訧扩增的影响,。利用优化的反应体系,从鮅璢物中筛选出条能够扩增出清晰、稳定条带的引物。以该条引物对龌艺泵潭缕分趾推渌鲆┯萌潭物品种基因组┰觯怖┰龀条带,其中多态性条带条,┯萌潭参锏囊糯ǘ嘌苑岣弧2⒗酶锰逑倒菇个灰毡毛忍冬新品种和其它个药用忍冬植物品种肝仆计祝纱臃肿铀浇个新品种与现在药用忍冬植物品种进行鉴别;利用Ⅵ椭鞒煞址治觯龉┦砸┯萌潭参品种划分为忍冬种群和灰毡毛忍冬种群龃罄啵恳淮罄嘤址治1狈街秩河肽戏街群。研究发现,不同药用忍冬植物品种之间的遗传差异与地理环境的差异存在相关性。艺泵潭缕分肿橹嘌难芯俊R曰艺泵潭缕分纸鸫淅佟⒁淅和白云为研究对象,采用单因素、双因素试验和正交试验设计,开展了外植体选择、灭菌处理、基本培养基、植物激素及其配比、锼嘏ǘ取⒒钚蕴颗ǘ取⑴嘌露取移栽基质、移栽容器、组培生根苗消毒处理、降低生产成本措施等系列试验,建立了组织培养的无菌体系,获得了适宜的初代培养基:金翠蕾和银翠蕾为.·,白云则为.·.·簧秆〕鍪室说继代培养基:金翠蕾为改良.·.·锼.·,白云则为改良·锼豲.·,·博士学位论文·唬
疓值有助于根原基生长发育。③不同的内源激素在灰毡毛忍冬愈伤组织和不现适当低温有利于诱导灰毡毛忍冬组培苗生根,找到了其组培苗生根培养的适宜温度为℃:筛选出銎分质室说纳嘌/.:.’#%。研究出组培苗“塑料杯单株一步移栽”技术,适宜移栽基质为黄心土房腔细砂:骄圃源锍苫盥蚀ヒ陨稀S昧箍水替代蒸馏水,白砂糖代替蔗糖配制培养基,可显著降低了组培苗生产成本,提高了灰毡毛忍冬新品种工厂化育苗的生产效益。艺泵潭缕分肿榕嗝缜げ宸敝臣际醯难芯俊R曰艺泵潭缕分帧鸫蕾’组培苗为试验材料,开展了不同的扦插基质、扦插时期、植物生长调节剂、浓度及浸泡时间对灰毡毛忍冬新品种组培苗扦插繁殖的影响试验,研究结果表明,扦插基质以泥炭土渲檠体积比R耍室说那げ迨逼谑月和拢室的植物生长调节剂是·腁莶逅,扦插成活率达%以上,大幅度降低了灰毡毛忍冬新品种组培苗生产成本。艺泵潭缕分肿橹嘌棠谠醇に乇浠难芯俊R越鸫淅僮榕嗝缥试验材料,分析了组培苗增殖分化、生根及愈伤组织和不定芽诱导过程的内源激素含量变化,研究了浓度对继代培养组培苗、ǘ榷陨嘌榕嗝缒谠醇に含量的影响。结果表明:①灰毡毛忍冬组培苗继代增殖分化主要受内源、骺兀细吲ǘ鹊腪和较低欣诨艺泵潭榕嗝缂檀鲋撤只适当高浓度的源匝吭鲋撤只蜕ひ灿欣饔貌幻飨裕细逫含量有利于灰毡毛忍冬外植体启动培养,但与增

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