文档介绍：SichuanAgriculturalUniversityADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementforMasterDegreeTransformationofPti4geneintocowpea(.),2014万方数据论文独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:溅搜加肜年6月/龃关于论文使用授权的声明本人完全了解INJiI农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名:导师签名:钦慢愎铡W仁年g月iw缉‘月/2/日㈣O\㈣呈㈣6\万方数据摘要本研究以‘成豇七号’、‘广东金冠’、‘白沙十七’、‘摘不完白籽泰豆’、‘宏达雪豇豆’5个豇豆栽培品种为材料,探讨不同基因型、不同浓度生长调节剂对豇豆子叶节诱导不定芽和再生的影响,以豇豆子叶节为外植体,建立了豇豆再生体系。以‘成豇七号’为材料,通过农杆菌介导的子叶节侵染和子房原位转化两种方法,将番茄抗病转录因子Pti4基因导入豇豆,并对转化材料进行PCR检测,筛选出转化环节中各影响因子的最佳参数,为豇豆转化提供参考和技术支撑。主要研究结果如下:研究了不同浓度6-BA对豇豆子叶节再生整个过程的影响,在豇豆种子萌发阶段,6-BA的添加有利于形成壮苗及促进后期不定芽的诱导,;诱导阶段的6-,,。为解决不定芽的伸长问题,在诱导和伸长阶段添加KT,伸长效果显著,,和对照相比,在不定芽诱导数和芽长上都有所增加,,。实验同时比较了TDZ前处理的影响,,。,生根率都能达100%,。5种基因型的豇豆子叶节不定芽诱导率存在差异,‘成豇七号’、‘广东金冠’优于其它三个品种,%%,。在农杆菌侵染子叶节的方法中,分别探讨了Kan、Cef对豇豆子叶节再生的影响,TDZ和6-BA前处理、预培养时间、侵染时间、共培养时间及pH等对遗传转化体系建立的影响。确定豇豆子叶节对Karl的抗性浓度为10mg/L,子叶节从无菌苗上切下一周后转入筛选培养基,筛选3周为最佳筛选方式。Cef抑制农杆菌的最佳浓度为200mg/L。在遗传转化体系建立过万方数据程中,TDZ前处理优于6-BA前处理,预培养时间为24h、侵染时间20min、共培养时间2d、。田间用子房原位转化法,选当天开的花,采用花柱全切的方式,以农杆菌菌液侵染子房切口,分别在当天三个时间段侵染,结果发现12点之前处理的花几乎全部脱落,下午3点到6点之间处理的花收获到种子。关键词:豇豆;子叶节再生体系建立;抗病转录因子Pti4;农杆菌介导;‘Chengiiang7’‘Guagndongjinguan’‘Baisha7’‘Zhaibuwan’and‘Hongda’.‘Chengjiang7’throughAgrobacterium—mediatedcotyledonarynodeinfecti