文档介绍：荧光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量一、。。。二、(1)常温下,处于基态的分子吸收一定的紫外可见光的辐射能成为激发态分子,激发态分子通过无辐射跃迁至第一激发态的最低振动能级,再以辐射跃迁的形式回到基态,发出比吸收光波长长的光而产生荧光。在稀溶液中,当实验条件一定时,荧光强度IF与物质的浓度c成线性关系:即(这是荧光光谱法定量分析的理论依据)。(2)荧光光谱激发光谱:固定测量波长(选最大发射波长),化合物发射的荧光强度与照射光波长的关系曲线。激发光谱曲线的最高处,处于激发态的分子最多,荧光强度最大。发射光谱:固定激发光波长(选最大激发波长),化合物发射的荧光强度与发射光波长关系曲线。固定发射光波长进行激发光波长扫描,找出最大激发光波长,然后固定激发光波长进行荧光发射波长扫描,找出最大荧光发射波长。激发光波长和发射荧光波长的选择是本实验的关键。(阿司匹林)水解即生成水杨酸(SA)(如下式)。而在阿司匹林中或多或少存在一些水杨酸,用醋酸—***仿作为溶剂,然后用荧光法可以分别测定其含量,少许醋酸还可以增加二者的荧光强度(本次实验只测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量)。在1%的乙酸—***仿中乙酰水杨酸的激发光谱和荧光光谱如图所示:(为了消除药片之间的差异,可以取几片一起研磨,然后取部分由代表性的样品进行分析)三、仪器与试剂:仪器:970CRT型荧光分光光度计及附件;容量瓶:1000mL2只,100mL2只,50mL8只;l0mL吸管2支;铁架台;研钵;称量瓶;玻璃棒;烧杯;定量滤纸;电子天平。试剂:冰醋酸;***仿;乙酰水杨酸;阿司匹林;***。四、实验步骤:,打开氙灯,再打开主机,然后打开计算机启动工作站并初始化仪器,预热30min左右。,在工作界面上选择测量项目,设置适当的仪器参数。:(1)配置1%的醋酸—***仿溶剂:在1000ml容量瓶中,将冰醋酸与***仿以1:99的比例配制。(2)配置储备液:%的醋酸—***仿溶剂中制成溶液,在1000ml的容量瓶中定容备用。(400ug|ml)(3)|ml的ASA溶液:在100ml容量瓶中将(2)中的标准液稀释100倍.(扫光谱)(4)配绘制标准曲线的ASA标准系列溶液:在5只50ml的容量瓶中用吸管分别吸取(3)中的溶液为1ml;l4ml;10ml;15ml;25ml,再用1%的醋酸—***仿溶剂稀释至刻度,计算出浓度分别是:|ml;|ml;|ml;|ml;|ml,贴上标签。:用(3)|ml的ASA溶液分别绘制ASA的激发光谱和发射光谱,并且分别找出它们的最大激发波长(Ex)和最大发射波长(Em)。:将(4)中的溶液即配绘制标准曲线的ASA标准溶液在相应的找出Ex和Em下分别测定其荧光强度,测定三次,求平均值。:取7片阿司匹林药片研磨成粉,