文档介绍：《现代免疫学年第卷第期
口服含一基因质粒疫苗菌对大鼠免疫功能的影响
叶建新,仉元亭,陈卫昌,张学光,任大明。
.苏州大学附属第一医院消化科,江苏省临床免疫学重点实验室, 苏州; .苏州大学生物技术研究所, 苏州
;.复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,上海
摘要:利用减毒沙门氏菌为载体将体内转染抗原提呈细胞,观察体内基因转染对大鼠免疫功能的影响。构
建含一质粒的减毒沙门氏菌疫苗菌,通过体外感染细胞观察疫苗菌的侵袭功能和携带外源
基因能力,验证疫苗菌作为基因转染载体的作用。疫苗菌周内连续灌服大鼠次,末次灌服后心脏取血处
死,—和荧光显微镜检测报告绿色荧光蛋白在脾脏细胞中的转录表达,流式细胞仪检测外周血和脾脏中细胞
表型变化。疫苗菌在体外能成功的将外源基因携带至细胞进行表达,灌服疫苗菌的大鼠外周血和脾脏细胞
和表达明显升高,外周血中、。。和,脾脏细胞中、也有明显的
增高。表明含基因的减毒沙门氏疫苗菌能实现体内基因转染, 的高表达能增强机体的细胞免疫功能。
关键词:—;减毒沙门氏菌;免疫功能
中图分类号: 文献标识码: 文章编号:———
/—为机体中一对重要的共刺激分利用腺病毒载体在体内联合转染机体
子,在抗原提呈细胞向细胞提呈抗原时作为第的抗肿瘤和免疫反应,但由于病毒载体对抗原提呈
二信号参与机体对抗原的反应,能明显增强机体对细胞的靶向性差和可能存在不安全因素,开发更为
各种抗原的反应能力。除了作为第二信号安全的体内转染方式成为研究热点。等通
参与机体免疫反应外,直接与表达于细胞或过利用先前在体外转染可以增强其功能的的质
等细胞的结合能明显增强细胞活性并具有粒皮下直接注射,但结果表明质粒皮下直接注射不
抗凋亡作用口。利用激发型单抗能明显增能增强细胞免疫作用。基于以上原因,有必要建立
强机体的细胞免疫反应,、有效的体内转染基因的方
始型的’细胞活化形成细胞毒细胞法。
;.通过细胞活化使其分泌一, 减毒沙门氏菌本身基因缺陷,不能在哺乳动物
后者同时具有活化细胞和调节。。向细胞内生长繁殖,不会引起全身的反应,但仍具有
极化的功能;.通过活化初始型细侵袭能力,可以将外源携带至体内并进行表
胞,使其分泌型细胞因子,增强细胞和达, 目前被认为是一种比较安全的载体。因此利
细胞的功能。。。作为生理性配用减毒沙门氏菌本身的侵袭全身单核系统的特性,
体同样具有与激发型单抗类似的生物学功将基因重组表达质粒在体内转染抗原提呈
能,并且不会有激发型单抗对机体产生可能的毒副细胞,建立一种新的体内基因转染方式,
反应,另外体内外实验表明,直接转染肿通过使机体中的抗原提呈细胞高表达进一
瘤细胞也能明显增强肿瘤细胞的免疫原性,发挥抗步对其生物学功能进行研究,为基因治疗
肿瘤作用。目前有部分研究者尝试通过体内基因疾病奠定实验基础。
转染而实现高表达,—等报道材料与方法
。材料雄性~周龄—大鼠由苏州大学动
收稿日期:;修回日期:—
物实验中心提供, 鼠伤寒沙门菌和
基金项目:江苏省自然科学基金资助项目;江苏省研
基因缺陷的减毒鼠伤寒沙门氏菌由美国
究生科技创新计划资助项目
作者简介:叶建新一,男,医学博士。大学教授惠赠, 含一—
通讯作者:陈卫昌—: . 和一