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复合调控与基因对水稻籽粒直链淀粉含量的影响激光生物学报关键酶基因耽过量与干涉复合表达对直链淀粉含量的影响,构建了耽过量表达与干涉结合的多痡..—唐秀丽,周玉琼,郑丽莉,江海洋,朱苏文摘要:颗粒淀粉合成酶和淀粉分支酶堑矸酆铣晒讨械牧礁龉丶福饬礁雒钢饕S眠和两个基因分别控制,它们的表达量直接影响直链淀粉和支链淀粉的含量比例。为了探讨水稻淀粉植株,半定量·觳獗砻髯;蛑晗抵械⒒虮泶锪棵飨栽黾樱鳶虮泶锪肯灾跎佟W;关键词:水稻;直链淀粉;;;缮妫还勘泶中图分类号:文献标识码:文章编号:㏒第卷第不张┮荡笱蒲аг海不帐∽魑锷镅е氐闶笛槭遥不蘸戏基因表达载体,并通过农杆菌介导的方法将其导人日本晴水稻中。经过觳夥治龌竦昧曜;蜓粜株系籽粒透明度明显降低,直链淀粉含量比野生型的平均高%,但是千粒重变化不大,与野生型相当。遗传分析表明这些转基因株系多数可稳定遗传。,收稿日期:恍藁厝掌冢基金项目:国家科技支撑计划;国家自然科学基金作者简介:唐秀丽,女,硕士,从事分子生物学研究ㄑ蹲髡撸簔甤年琙琙琙,珻:猙簉籥;;;琒,甌猙,.甀産猰.—琣瑆瓽瓵,%.—瓽;.—
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水稻中直链淀粉由蜡质基因眠编码的颗粒结因间互作效应中,眠与的互作效应较大。牧虾头椒唐秀丽等:复合调控耽与基因对水稻籽粒直链淀粉含量的影响表根据忻吆汪娥呕荰酶各梗樱琩稻米的主要成分是由分支很少的直链淀粉和高度分支的支链淀粉两类淀粉组成,直链淀粉和支链淀粉的比例以及支链淀粉的精细结构决定了稻米的物理化学特性、营养品质和最终的产量⋯。随着水稻育种技术的提高,人们对稻米的品质要求也越来越高,而稻米的直链淀粉含量被列为评价稻米品质的重要指标之一嵋8咧绷吹矸凼粲诳剐缘矸,可用于制作糖尿病、结肠癌、肥胖等病人的保健食品;它还可以制作成可降解塑料,对解决当前白色污染问题、保护环境具有很深远的影响。,基因控制,在水稻中主要有两类淀粉分支酶基因:和T诨有关利用扇偶际跆岣咚局绷吹矸酆的研究已有了转基因分析报道,但在相关研究中发现籽粒千粒重显著降低,而且直链淀粉含量越高,千粒重越低∞1究翁饫霉勘泶锛际鹾蚏干扰技术的综合效应构建了过量表达与干涉结合的多基因表达载体,并通过农杆菌介导的方法成功将其导人日本晴水稻中,期望得到的转基因植株系中直链淀粉含量显著提高的同时,千粒重不再明显降低。这将为稻米品质和产量的遗传改良提供实验所用的理论依据。材料供试水稻为粳稻品种日本晴,由安徽省农科院惠赠。根癌农杆菌、大肠杆菌⑺V粒杀臼笛槭冶4妗、内切酶、靥、酆厦购自大连公司。质粒提取试剂盒、凝胶回收试剂盒及反转录试剂盒购自北京全式金生物公司。培养基所用药品均为静贰39媸约辆为国产分析纯。方法过量表达与干涉结合的多基因表达载体的构建因序列分别设计了匾煲铮肦狿方法,从粳稻品种日本晴未成熟种子的中克隆到完整的基因和基因的片段各一个。以水稻总基因组D0澹┰雠呷樘匾煨云舳踊锛。从Τ绦蛭#姹湫姹湫退火延伸鲅罚℃延伸℃保温。从μ寤稬,含、、上下游引物疞及第,—,/
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激光生物学报点,得到的阳性克隆耽次:械⒒虻的耽片段与洌垂菇ǔ啥嗷=玃纯化的耽基因半定量—觳庾;蛑仓闣峁敕治利用┰龀雠呷樘匾煨云舳覩蛋白腥载体中的捌渖嫌的舳樱谙嘤Φ奈恢米吧螱改造成连接到改造的亩嗫寺∥过量表达载体。选取炕腟蚱危别正反