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乙醛脱氢酶阳性乳腺癌干细胞的分离培养及其生物学特性分析·论著·地形成肿瘤。雀曛な盗司哂蠧眦一钟等【芯糠⑾郑谌死嘣煅8桑嫦赴⑸窬桑嫦干细胞是一类具有自我更新和多向分化能力的多潜能细胞。因其自身特点及其与肿瘤细胞在某些生物学特征的相似性,有人提出肿瘤可能是一种源于干细胞的疾病。.等【在年从乳腺癌组织中分离出一类表型特异的细胞錍灰粒痩一,也称乳腺癌起始细胞珺甀,并发现这类细胞在裸小鼠中可持续表型的乳腺癌干细胞的存在,并实现了体外分离纯化与扩增。乙醛脱氢酶是将细胞内视黄醇氧化为维甲酸的关键酶,而维甲酸信号通路在细胞分化和干细胞自我更新中起重要作用。取っ鰽在于细胞自我更新和早期分化中起关键作用。瓤坪蚆胞中以及急性白血病于细胞群中钚韵灾潘翠萍邵军范威吴新红马彪虯“玄橄赴矍赴渚嗬朊飨运醵蹋淝ㄒ颇芰γ飨郧坑诙哉兆椋伊饺焊上【】魿四这类细胞称为成瘤细胞冯尧军【摘要】目的证实人类乳腺癌细胞系中存在乙醛脱氢酶阳性橄侔└上赴并研究橄侔└上赴逋庠鲋场⑶└桑嫦赴ü凼匝椤法生长曲线测定以及法等检测橄侔└上赴纳镅匦浴=/。矗细胞的生长曲线基本一致;一铲胞之间存在差异;实验结果,与对照组相比,一伊矗、皇盋两组细胞有大量细胞过膜,三组觳馕舛戎捣直鹞.±、..±。结论细胞系中存在鵦:虯’眂乳腺癌干细胞,可作为鉴定乳腺癌干细胞的分子标志之一。【关键词】乳腺肿瘤;肿瘤干细胞;乙醛脱氢酶;生物学特性睥鬋智矗恢荂絮矗甌絮魿贺矗﨏【肿瘤研究与临床年月第卷第期%甅恢荂一岔矗一留二涣作者单位:武汉,湖北省肿瘤医院乳腺科通信作者:马彪,簃琧產猦.:,簃甤,甊%%...±.瓹籘籄;...·,,琋
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牧嫌敕椒峁流式细胞术分选结果乳腺癌干细胞免疫荧光结果高;更为重要的是萚发现在部分人类乳腺癌组织中可检测到鞍赘弑泶铩S纱送贫希新标志物。本研究正是从这一点出发,利用流式细胞术从人类乳腺癌细胞中分离出具有高度活性的表型为一玄的活细胞群,通过探讨其细胞生物学特点,判断欠裎H橄侔┯谙试剂加拿大公司,虵购自美国公司,透明质酸酶和胶原酶.Ⅲ。方法流式细胞术分选细胞及细胞培养复苏细胞,、禾跫拢嘌痬嘁涣疵顾氐腄完全培养液,隔天换液。待达到一定数量后,选取融合率约为%的细胞进行流式细胞术分选。用胰酶用吹又匦⒔邢赴剖瓜赴芏却锏羐水乎离心锨澹琍洗涤重悬后,加℃培养。羐水平离心,弃上清,撼逡褐匦I匣辛魇椒盅法依次加入相应抗体进行培养,并用甘油封固,荧光显微镜下观察并照相。ḿ觳馍で—匦盅『蟮南赴岸哉兆橄赴℃恒温培养。每灰次,用ú舛挎軱孔板,连测⒔ú獾玫腁值绘制成曲线。取未分选的细胞、一/孔一玄矗三群细胞,分别消化并调整细胞密度为。个/,接种于孔板中,每组平行鲅荆眉尤%血清、%發%—℃恒温培养,直至形成细胞单层。在单层培养细胞上,用移液器滴头沿培养板底部呈“一”字形划痕,吹。椋コ∠赴⒕迪录锹蓟鄣相对距离,上述培养液继续培养;培养、鄄迁移情况,并照相记录镜下划痕相对距离,计算出细将小室放入培养板中,,吸去培养液。制备细胞悬液,胰酶消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,用吹—椋煤珺孔板下室加人蒷培养液。常