赤点石斑鱼MHC IA基因的克隆与表达多态性分析.pdf

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赤点石斑鱼基因的克隆与表达多态性分析沈铭辉@衷坪耄偶延,王厦门大学学报匀豢蒲О军牧嫌敕椒材料来源及处理引物设计中图分类号:文章编号:———主要组织相容性复合体琈山裘芰母叨榷嗵蛭坏闼成,广泛存在于脊椎动物体内,与免疫密切相关并编码免疫球蛋白样受体,其产物是免疫系统中极为复杂且最具多态性的一类细胞表面转膜蛋白,,其中喾植在所有有核细胞表面,负责内源性抗原缰琢隹乖病毒抗原募庸ず统实荩訦等得鲤鱼蛐蛄幸岳矗壳耙讯园呗碛恪⒀,但目前其野生资源已遭极大破坏,,、病害严重等问题,尤其石斑鱼神经坏死病毒浅嗟闶哂愕闹饕2≡猿嗟闶哂愕养殖破坏极大壳岸允哂忝庖呦喙鼗虻难原鹬饕5莩首饔玫腗嗷虻南喙匮芯浚本研究以赤点石斑鱼为研究对象,通过技术克隆获得了基因的全序列,并且对其组织表达特异性和多态性进行检测,,体质量驶钛吩菅螅渥橹心、肌肉、肝、头肾、鳍、脑、胃、肠、鳃及性腺〕,,分别设计用于扩增撕’端的巢式锚定引物和、,福建厦门;=ㄊ∷芯克=ㄏ妹捅要:采用技术,成功克隆获得赤点石斑鱼非特异性免疫因子,含有疷、启动子、多肽结合区】区、跨膜区、胞质区和分子具有经典鞍追肿拥目占浣峁梗诙嚯慕岷锨虼嬖诩浞岣坏谋湟欤肦有效表达,在头肾。脾,胸腺等免疫组织表达量不仅高,表达多态性也异常丰富,而在与外界环境接触较多的鳃、肌肉、,根据肿又邢喽员J氐腎区氨基酸序列构建了脊椎动物的系统进化树,也表明了该关键词:赤点石斑鱼;文献标志码:状位究已有一些报道∞形醇阅谠葱钥乖病毒抗的;鹨狪、獻,,序列全长为区,编码区大小为,共编码个氨基酸,,发现其在头肾、心、肝等个组织器官中均能分子的被嵝蛄锌梢宰魑Q芯坑憷辔镏治式叵档牧己帽昙牵基因;多态性;:—基金项目:福建省种业创新与产业化工程项目鲋质号ㄐ抛髡撸簂甤
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结果的克隆觳单链构象多态性分析序列拼接及全序列分析软件统计序列总长、各碱基百分比、含量等信结构,通过://州..⒁颩中间序列;利用分别同—蚆涠裕’的扩增;利用、琑蚈~为引物,,对赤点石斑鱼的个不同器官组织浴⒊Α⑵ⅰ⑽浮⒀!⑿叵佟⑿腺、头肾、心、鳃、#×循环,反应过通过所设计的特异引物隨扩基因猿嗟闶哂慵∪狻⑿叵佟脾等个组织的为模板,进行从μ跫#×循环,℃。用范ㄆ淇7旁亩量颍⒉