文档介绍：概述:、糖脂、蛋白多糖、核糖;→供能障碍→一系列代谢变化实验Folin-Wu法定量测定血糖的含量血糖的来源和去路血糖测定的目的和意义高血糖症:,有生理性和病理性之分,临床上最常见的病理性高血糖症是糖尿病。糖尿病:是一种慢性、复杂的代谢紊乱性疾病,系胰岛素绝对不足或相对不足,以高血糖症为基本生化特点。同时伴有糖、脂类、蛋白质、水、电解质和酸碱平衡紊乱,甚至出现一系列并发症如眼、肾的微血管病变及神经病变等。症状+随机血浆葡萄糖≥,或空腹血浆葡萄糖≥。症状不典型者需另一天再次证实。随机血糖是指一天中的任一时间采血测得的血糖浓度。糖尿病典型的症状是“三多一少”,即多饮、多尿、多食及消瘦糖尿病的诊断标准血糖的测定方法测定方法酶法:(1)己糖激酶法(HK) (2)葡萄糖氧化酶法(GOD法)特异性高,灵敏度高,干扰因素少,适用于自动化分析,为葡萄糖测定的参考方法,但是试剂较贵无机化学法:Folin-Wu法,特异性差有机化学法:邻甲苯***法、联苯***法、氨基联苯法干扰因素多一、目的要求1、掌握Folin-Wu法测定血糖含量的原理和方法。2、学会制备无蛋白血滤液。3、掌握7200型可见分光光度计的使用方法。二、实验原理葡萄糖是一种多羟基的醛类化合物。其醛基具有还原性,与碱性铜试剂混合加热,葡萄糖分子中的醛基被氧化成羧基,,Cu2+即被葡萄糖还原成Cu+(Cu2O)而沉淀。Cu2+(CuSO4)+葡萄糖Cu+(Cu2O)无蛋白血滤液中的葡萄糖和酸性钼酸盐溶液共热反应,Cu2O又把酸性钼酸试剂(Mo6+)还原成低价的蓝色钼化合物—钼蓝。Cu2O+酸性钼酸试剂蓝色钼化合物OD420比色血滤液中葡萄糖的含量与产生的Cu2O成正比,而Cu2O的量与产生的钼化合物的量成正比。可用比色法定量的测定。三、实验仪器1、25mL血糖管×3支; 2、血糖管橡胶塞×3个;3、1mL胖肚吸管×1支; 4、100mL锥形瓶×2个;5、漏斗架×1个; 6、普通漏斗×2个; 7、水浴锅×1个;8、电炉×1个; 9、移液管1mL×2支;2mL×3支;5mL×2支;10mL×1支; 10、滤纸×1盒; 11、吸耳球×2个;12、7200型分光光度计×1台; 13、表面皿×1个血糖管奥氏吸管7200型分光光度计1、标准葡萄糖溶液()(1)1%葡萄糖母液:,溶于蒸馏水,稀释并定容至100ml。(2)葡萄糖标准液:,加蒸馏水定容。2、10%钨酸钠溶液:称取钨酸钠10g,溶于蒸馏水并定容至100毫升。3、:于53ml蒸馏水中加入1ml的浓硫酸。4、碱性硫酸铜溶液A液:无水碳酸钠35g,酒石酸钠13g及碳酸氢钠11g溶于蒸馏水,:硫酸铜晶体5g,溶于蒸馏水并定容至100ml。临用时,A液:B液=9:1混合(体积比),混合液于冰箱中保存(4℃)。四、实验试剂5、酸性钼酸盐溶液:称取钼酸钠600g,用少量蒸馏水溶解后倾入2000ml的容量瓶中,加蒸馏水至刻度,摇匀,倾入另一较大的试剂瓶中,,摇匀,静止数小时后取上清夜500ml,于1000ml容量瓶中,徐徐加入225ml85%磷酸,边加边摇匀,再加25%硫酸150ml。置暗处次日,用空气将剩余的溴赶去。然后加99%醋酸75ml,摇匀,用蒸馏水稀释定容至1000ml,贮于棕色瓶中。