文档介绍：体外诱导大鼠骨髓干细胞分化为胰岛素分泌细胞张伟指导教师:申请学位级别:论文提交日期:专业名称:临床检验诊断学年大连医科大学学位授予时间:年答辩委员会主席:计:学位论文:页表格:插图:学位授予单位:孟秀香教授硕士学位论文答辩日期:年评阅人
盟年上月旦日独创性声明学位论文作者签名:丛:睦本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。签字日期:
咀年上月监日指导教师签名:盘系孟论文作者签名:叠亟鱼学位论文版权使用授权书本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。签字日期:、
体外诱导大鼠骨髓干细胞分化为胰岛素分泌细胞指导教师:孟秀香教授专业名称:临床检验诊断学硕士研究生:张伟摘要相同,但总体上都比较繁琐,而且大多都应用细胞因子。这大大地限制对照组细胞分泌到细胞外的胰岛素含量。目的:糖尿病是一种严重危害人们健康的慢性疾病。胰岛细胞移植可能是不依赖胰岛素治愈糖尿病的最佳方法。但由于移植材料匮乏,这种治疗方法的推广受到了限制。目前研究表明多种来源于细胞可以通过体外诱导分化为胰岛素分泌细胞,这为胰岛细胞移植提供了新的来源。因骨髓干细胞具有多种分化潜能、取材容易、可以避免免疫排斥反应等优点,使其成为诱导分化胰岛细胞的最佳候选千细胞。有研究显示骨髓干细胞在体外可以诱导分化为胰岛素分泌细胞。各种诱导方法虽然不尽了骨髓干细胞作为胰岛细胞移植的来源在临床上的广泛应用。本实验尝试在体外通过简单的非细胞因子方法诱导大鼠骨髓干细胞,使其分化为胰岛素分泌细胞,并应用一系列方法对诱导的细胞进行检测,目的在于探索一种不应用任何细胞因子,简单易行的诱导方法,从而为骨髓干细胞作为胰岛细胞移植的来源在临床上实际应用提供进一步的理论依据及新思路。方法:⒅票甘笪步涸捌淌笪步涸牟F傲鵬濉、分离大鼠骨髓细胞。⒔ǚ掷氲墓撬柘赴直鹕栉狣案咛腔肪撑嘌诱导组和低糖环境培养的对照组。⑼ü怪孟晕⒕倒鄄煊盏甲楹投哉组细胞形念的改变。⑼ü螂耆旧ǖ姆椒ḿ觳庥盏甲榧岸哉兆橄赴胰岛素的合成。⑼ü庖咦榛姆椒ḿ觳庥盏甲榧岸哉兆橄赴诘鞍质水平上胰岛素的表达。⑼ü齊甈的方法检测诱导组及对照组细胞在水平上胰岛素的表达。⑼ü鼸的方法检测诱导组及结果:⒂盏甲樾纬傻南赴旁谛翁嫌胍鹊菏窒嗨疲攵哉兆形成的细胞团明显不同。⒂盟螂甓杂盏甲楹投哉兆榈南赴沤腥色,诱导组的细胞团呈现猩红色,表明细胞中有锌离子,提示有胰岛素
白水平表达胰岛素,而且能将其分泌到细胞外,提示二***亚砜和高糖环的合成,而对照组不显色。⒚庖咦榛旧ń峁允居盏甲槌叛赴胞浆中有胰岛素外,圆形、椭圆形和部分梭形的分散的单个细胞中也含有胰岛素。对照组的细胞中无胰岛素存在。甈结果显示在水平上诱导组细胞表达和,而对照组不表达。方法检测诱导组细胞分泌到培养液上清中的胰岛素的量平均为.±疞,而对照组为.±疞。:用二***亚砜和高糖环境的方法诱导骨髓于细胞,能够形成在形态上与胰岛十分相似的细胞团。诱导组细胞不仅在水平及在蛋境能诱导骨髓干细胞分化为胰岛素分泌细胞。关键词:骨髓干细胞胰岛细胞分化
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体外诱导大鼠骨髓干细胞分化为胰岛素分泌细胞指导教师:孟秀香教授专业名称:临床检验诊断学硕士研究生:张伟言前糖尿病,殉晌<绦难9芗膊『椭琢鲋蟮第三大疾病,目前全球糖尿病患者约我国接近万ぜ年将达到凇尽АS捎谄淇梢⒍嘞低乘鹕耍⒆钪盏贾律龉δ芩竭,因此对人类的健康造成严重的威胁。自年发现了胰岛素至今,糖尿病的治疗以药物和注射胰岛素为主,但由于其带来的副作用及无法根治使各国科学家一直都在寻求更好的治疗方法。在二十世纪七十年代,等证实通过移植胰岛可治疗患糖尿病的啮卤类动物的高血糖症,年,萚颗浜厦庖咭种萍两ǚ掷氲男孪实娜艘鹊鹤⑸涓型糖尿病患者,结果患者不依赖胰岛素的时间及代谢控制良好的平均时间超过了个月。这个被称为“”5旅啥俜桨的治疗方法为糖尿病患者带来了新的希望。但由于移植材料匮乏,这种方法的推广受到了限制。随着对于细胞不断深入的研究,发现多种来源的干细胞通过体外诱导都能分化为胰岛细胞。目前研究比较多的有胚胎干细胞【,⒁认俚脊上