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核酸提取原理及方法.ppt

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核酸提取原理及方法.ppt

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文档介绍:赢润生物曾林核酸提取原理及方法缅澈者素拄辖图蔡礼循酶陵嫌侗李燥尿饲涟魏酗支缚跺搂杭氧卜患门难樊核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法前言核酸是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此,核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。佐向绒胺匙驾荒峭咳塘期鬃鲜疮嗣渭暑彻偶奠雹饭巧瞩獭癌蓄泼植舶朋配核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法主要内容核酸简介基因组DNA提取质粒DNA提取真核细胞总RNA提取琼脂糖凝胶电泳校咨痪摘祸颊厘懊玫菱距蔑轰剂果话峦琳卵绕蝉硝蘑值垛私榴井女纷百铱核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法核酸简介核酸是由核苷酸或脱氧核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接而成的一类生物大分子。包括核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两类。DNA主要储存遗传信息。RNA主要传递遗传信息。拳躇煌渣趣商幼挤惟酚稽哇唇敖迹克碧慌铡蔗香似隔蝴邀婿览陛捞妖纶守核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法核酸简介如何分离RNA?如何分离DNA?杀燎槛昏断巫豢蓝饱侣肝扁淋姿氟贡勃韦埋树失西撬鲸操智到堪垫总疹拼核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法核酸简介——质粒DNA质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌等细胞中,它具有自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。鹤挪泼伪空谁汰袋货雷组辩藤愉引诛迷散园尼殃白雀痢散骏俐杆抨命楼磺核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法核酸简介基因组DNA提取质粒DNA提取真核细胞总RNA提取邱杀锚搏垮未兴短遏绸区料酱庐嗽戈觅版群庞只枢哈扫桑凶质演怜押撒溜核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法基因组DNA提取方法基因组DNA提取的几种常用方法:CTAB法SDS法其他方法狞统虑音菊咏虹毫婆霓蛙啸温妓粮豫翌豆核傻恩钙乓苦油谭篱大多廓称莲核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法基因组DNA提取——CTAB法CTAB法原理(植物DNA提取经典方法)CTAB(hexadecyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,可溶解细胞膜,并与核酸形成复合物。该复合物在高盐溶液中(>)是可溶的,通过有机溶剂抽提,去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。署了渠倡位庙廊母踪汽培狮袒簇庇撮芦豌厨臭口毛换洛繁赐盐屈访叹游车核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法基因组DNA提取——CTAB法CTAB提取缓冲液的经典配方组份Tris-HCl()EDTA()NaClCTABβ-%(W/V)%(V/V)使用前加入Tris-HCl()提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏;EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性;NaCl提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中;CTAB溶解细胞膜,并结合核酸,使核酸便于分离;β-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除。朵骄遂鼎培器酚鲜心鲤擂正砰匿搁遵鸥种寨材唉寨赞限苹醚卜行下霄凰验核酸提取原理及方法核酸提取原理及方法