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非正常形态红细胞对拉曼光谱判别的影响王桂文砹⑿,姚辉璐剖,陈萍栌狼tan10右,周缘胛左右,具有较大的表面积,,采集门诊病298月光谱学与光谱分析摘要血红细胞对环境敏感,细胞形态很容易发生改变,皱缩甚至形成棘形。文章应用光镊拉曼光谱技术俘获、收集来自健康个体和地中海贫血患者的正常形态、一般皱缩和棘彤红细胞的拉曼光谱,从平均光谱、主成分分析等方法分析不同形态红细胞的光谱差异与胞内的变化,及其对光谱诊断分析的影响。结果发现,在正常的生理环境下,红细胞发生皱缩甚至形成棘形细胞并不影响光谱判别分析。关键词地中海贫血;皱缩红细胞;棘形红细胞;拉曼光谱06573ADOI103964jissn1000-0593(2009)08-2117-05红细胞是人体血液细胞中数量最多、寿命最长的一种细胞,为双凹圆盘状,平均直径换。胞内充满了大量的血红蛋白琀,在机体[1]一定的弹性和可塑性,可改变形状通过毛细血管。但红细胞对环境很敏感,细胞形态很容易发生改变,皱缩甚至形成刺球状。在病理状态下,部分红细胞也会发生皱缩或形成棘形,这种细胞形态的改变是一些疾病诊断的辅助指标之[地中海贫血虺频仄是由于患者编码珠蛋白链的基因发生缺陷或缺失,部分珠蛋白链无法合成而造成的遗传性溶[3]白电泳方法作为主要地贫诊断依据,以基因分析或高效液相法【确诊,诊断分析程序繁锁,诊断周期较长。随着光谱技术的发展,分子振动光谱已广泛应用于生物复杂体系的研究中睁“,其中,拉曼光谱具有实时、快速、无损等特点,可在分子水平反映物质的组成、[89]Liu1胞拉曼光谱技术检测地贫的研究,但由于血液样品通常是经过抗凝剂处理和低温保存,在实施拉曼检测时的细胞一般会发生了皱缩甚至r皱缩。红细胞发生皱缩甚至棘形化,其胞内是否发生变化,是否影响到拉曼光谱的检测和光谱判别的效果呢,本文通过应用俘获分析正常人和地贫患者在正常的生理条件下,正常形态、一般皱缩和皱缩成刺球状红细胞的拉曼光(PcA)改变对光谱的影响,及其对判别分析的影响。同时对比了由于高渗而形成皱缩的红细胞对光谱分析与判别的影响。血液样品收集ACD4用。实验装置本实验采用与文献相同的实验系统,用悬浮在水中(20进行校正。光谱收集000200FL1008tan10S,153000325300213GreenvilleNC收稿日期:.修订日期:——基金项目:国家自然科学基金资助项目和广西科学院科技创新项目鹂圃貉资助作者简介:,广西科学院生物物理实验室副研究员:甤,—27858-4353USAspectroscopyLTRS):
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erytb啦2(a)PCA2erythrocy(b)The得的光谱,为源自溶液和实验系统的背景光谱,ilIlaof籧光谱学与光谱分析第卷带背景的单个血细胞拉曼光谱;移开细胞,保持激光束聚焦高度不变,用同样的时间收集背景拉曼光谱。收集正常形态、皱缩和棘形红细胞的拉曼光谱,每种细胞收集个左右的光谱。27NaCl1h红细胞的拉曼光谱和稀释在生理盐水中的正常形态红细胞的拉曼光谱。数据处理将光谱数据转换为荩淙肴砑﨧处理。血细胞的实际光谱通过下列等式计算得到:一。等式中,为每个血细胞测是系统响应函数。所有的细胞实际光谱的平均值为每